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1、本研究的目的是探討內(nèi)源性骨關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis,OA)生物學致病因子對正常關(guān)節(jié)軟骨的初始破壞作用,為OA的生物學病因研究提供新方法。 方法:應(yīng)用ACLT方法建立膝關(guān)節(jié)力學OA動物模型,檢測實驗組和對照組血清和膝關(guān)節(jié)滑液中多種生物學致病因子含量。將膝關(guān)節(jié)OA晚期滑液抽出后立即隨機注入動物自體一側(cè)肘關(guān)節(jié)(SF組),對側(cè)肘關(guān)節(jié)注入等量生理鹽水(NS組)。通過反復(fù)、定期注射后,運用大體、光鏡、電鏡和PCR等檢測方法觀察S
2、F組、NS組和對照組肘關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)軟骨形態(tài)學改變和測定軟骨細胞多種生物學致病因子mRNA轉(zhuǎn)錄水平變化。 結(jié)果:實驗組和對照組血清中生物學致病因子含量無差異。實驗組膝滑液中TGF-β1、MMP-3、TIMP-1和NO含量顯著減少,IL-1β與TGF-β1的含量比值顯著高于對照組。SF組大體觀察尺骨鷹嘴滑車切跡外側(cè)關(guān)節(jié)面中央可見關(guān)節(jié)軟骨剝脫、軟骨下骨裸露。光鏡下,SF組軟骨表面粗糙,有小的裂隙,各層軟骨基質(zhì)染色不均,可見大量粗大、排列紊
3、亂的條帶,潮線前移,軟骨細胞排列紊亂,有大量軟骨細胞巢聚;軟骨鈣化層和全層明顯增厚;軟骨基質(zhì)非鈣化層、鈣化層和全層中Ⅰ型膠原單位面積含量明顯增多,鈣化層中Ⅲ型膠原單位面積含量明顯增多。透射電鏡下,SF組出現(xiàn)細胞壞死、凋亡和類死亡,胞質(zhì)內(nèi)可見膠原團塊。掃描電鏡下,SF組軟骨表面波浪狀變淺,局部增厚,多處表層組織結(jié)構(gòu)消失,形成表淺潰瘍,膠原中斷、外露。SF組肘關(guān)節(jié)軟骨細胞中MMP-1和MMP-3 mRNA轉(zhuǎn)錄顯著增加。NS組和對照組在大體、
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