大鼠皮質(zhì)脊髓束的應(yīng)用解剖學(xué)研究.pdf

1、第一部分皮質(zhì)脊髓束在大鼠脊髓內(nèi)的精確定位 目的：確定大鼠皮質(zhì)脊髓束在延髓和脊髓白質(zhì)內(nèi)的走行和精確定位。 方法：選用成年SD大鼠，采用Luxolfastblue(LFB)染色法和proteinkinaseCγ(PKCY)特異性抗體免疫組織化學(xué)染色法在冠狀面、矢狀面、橫斷面三種不同切面上對(duì)正常大鼠皮質(zhì)脊髓束進(jìn)行解剖定位。結(jié)果：在延髓錐體中，LFB染色標(biāo)記的深藍(lán)色的有髓纖維經(jīng)錐體交叉至脊髓頸、胸、腰、骶段后索腹側(cè)，與周圍淡染的

2、纖維易于區(qū)別；PKCγ陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)物呈棕色，分布于延髓腹側(cè)面的錐體中，在延髓錐體下部絕大部分交叉到背側(cè)面，在脊髓白質(zhì)內(nèi)沿后索腹側(cè)下行，至脊髓的骶尾段。同時(shí)延髓和脊髓背角神經(jīng)元中也有PKCγ免疫陽(yáng)性物質(zhì)存在，在脊髓前索和外側(cè)索未見有PKC丫陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)物。LFB陽(yáng)性纖維和PKCγ免疫陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)物在延髓錐體和脊髓后索內(nèi)的定位分布與大鼠皮質(zhì)脊髓束在延髓和脊髓中的位置和走行相一致。結(jié)論：運(yùn)用LFB染色和PKCY特異性抗體免疫組織化學(xué)染色可以清晰對(duì)正

3、常大鼠皮質(zhì)脊髓束進(jìn)行精確解剖定位，為進(jìn)一步研究皮質(zhì)脊髓束的損傷和功能重建提供形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。 第二部分大鼠皮質(zhì)脊髓束半橫段損傷模型的建立 目的：成功制作大鼠皮質(zhì)脊髓束半橫斷損傷模型。方法：選擇性切割大鼠延髓左側(cè)錐體，建立大鼠皮質(zhì)脊髓束半橫斷損傷模型，采用斜板實(shí)驗(yàn)進(jìn)行行為學(xué)檢測(cè)，運(yùn)用LFB染色法、生物素化葡聚糖胺(BDA)神經(jīng)示蹤法和PKCY免疫組織化學(xué)染色法對(duì)模型進(jìn)行形態(tài)學(xué)評(píng)判。結(jié)果：皮質(zhì)脊髓束損傷組大鼠術(shù)后右側(cè)前后肢癱瘓，

4、斜板實(shí)驗(yàn)顯示運(yùn)動(dòng)功能受限；LFB染色可以看出損傷部位左側(cè)皮質(zhì)脊髓束無(wú)LuxolFastBlue濃染神經(jīng)纖維束；BDA神經(jīng)示蹤法結(jié)果顯示在錐體交叉平面，僅見一束BDA陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)右側(cè)交叉至左側(cè)，在脊髓后索的左側(cè)半下行至骶尾段，而在損傷平面以下，未見有BDA陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)左側(cè)錐體交叉至右側(cè)，在整個(gè)脊髓后索的右側(cè)半未見有BDA陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)物。PKCγ免疫組織化學(xué)染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)延髓錐體右側(cè)半有一束PKCγ陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)右側(cè)交叉至左側(cè)，脊髓后索腹側(cè)

5、部左側(cè)半有PKC丫陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)物，而脊髓后索腹側(cè)部右側(cè)半未見有PKCγ陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)物。結(jié)論：選擇在延髓切斷一側(cè)錐體制作皮質(zhì)脊髓束半橫斷損傷模型，定位準(zhǔn)確，重復(fù)性好，結(jié)果可靠，是研究皮質(zhì)脊髓束的可塑性和神經(jīng)軸突再生的理想動(dòng)物模型。BDA神經(jīng)束路示蹤法和PKC7免疫組織化學(xué)染色法可作為皮質(zhì)脊髓束半橫斷損傷模型的形態(tài)學(xué)指標(biāo)。 第三部分大鼠皮質(zhì)脊髓束半橫斷損傷后皮質(zhì)脊髓束超微結(jié)構(gòu)的變化 目的：觀察皮質(zhì)脊髓束半橫斷損傷后皮質(zhì)脊髓束超微

6、結(jié)構(gòu)的變化。方法：選擇性切割大鼠延髓左側(cè)錐體，建立皮質(zhì)脊髓束半橫斷損傷模型，模型制作后4d、14d、28d，采用透射電鏡觀察受損皮質(zhì)脊髓束超微結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果：皮質(zhì)脊髓束半橫斷損傷后，受損皮質(zhì)脊髓束髓鞘和軸索發(fā)生腫脹，形態(tài)不規(guī)則。隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，潰變進(jìn)行性加重，受損皮質(zhì)脊髓束主要表現(xiàn)為髓鞘破壞、溶解及軸索脫髓鞘病變、胞漿濃縮、細(xì)胞器增多及空泡樣變性。脊髓頸、胸、腰段受損皮質(zhì)脊髓束的潰變比損傷部位嚴(yán)重。結(jié)論：皮質(zhì)脊髓束半橫斷損傷后，受損皮