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文檔簡介
1、目的:驗證本實驗組雙側紅核脊髓束和雙側皮質脊髓背側束的定位損傷模型,通過尼氏染色和免疫組化的方法,觀察不同進化程度的中樞神經(jīng)纖維損傷后,相應腦組織學變化的初期表現(xiàn)。
材料和方法:利用自制損傷刀片改良制備SD大鼠頸脊髓雙側皮質脊髓束背側束(dCST)、紅核脊髓束(RST)精確定位損傷模型,并通過BBB評分,BDA順行示蹤驗證模型。模型驗證成功后將18只SD雌性大鼠,隨機分為dCST-2周組(n=3)、dCST-3周組(n=3
2、)、RST-2周組(n=3)、RST-3周組(n=3)及假手術對照組(n=3)5組。前4組分別進行頸脊髓背側皮質脊髓束或紅核脊髓束精確定位損傷,假手術對照組采取椎板咬除術,不進行脊髓損傷。造模成功后第2、3周分別對各組大鼠進行升主動脈灌流固定、提取腦組織,進行冰凍切片,經(jīng)過尼氏染色和免疫組化分析,統(tǒng)計學軟件SPSS統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)。
結果:造模通過BDA順行示蹤顯示皮質脊髓束背側束(dCST)和紅核脊髓束(RST)完全中斷,示
3、造模成功。兩實驗組在損傷后2W時間點活性細胞數(shù)與假手術組比較均有減少,3W時間點細胞數(shù)目可見回升,但均少于假手術組。損傷后RST2w大鼠神經(jīng)細胞存活率較dCST2w組低,但dCST3W與RST3W之間沒有統(tǒng)計學差別。免疫組化結果顯示RST組與dCST組tubulin-α表達在損傷后2W時間點與假手術組對比均有降低,損傷后3W時間點表達均有回升,整個損傷后過程中dCST組tubulin-α表達高于RST組,但兩組數(shù)據(jù)組間相對tubulin
4、-α表達統(tǒng)計學分析無差異(p>0.05)。RST組與dCST組GAP-43表達趨勢大致相同,表現(xiàn)為先升高后略降的過程,RST組GAP-43表達較dCST組維持在更高水平,兩組數(shù)據(jù)組間統(tǒng)計學分析有差異(p<0.05)。
結論:進化程度不同的RST與dCST損傷后在相應腦組織學改變上存在差異,在活性細胞計數(shù)與GAP-43表達上,RST損傷組優(yōu)于dCST損傷組。而在神經(jīng)修復其他因素方面RST損傷組是否亦優(yōu)于dCST損傷組,以及R
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