螺旋藻對阿霉素腎硬化大鼠腎臟保護作用的研究.pdf

1、目的:
　　慢性腎臟疾病是目前世界范圍內(nèi)影響人類健康的重大疾病之一，其共同最終轉(zhuǎn)歸會形成腎衰竭至尿毒癥，共同病理途徑是進行性腎小球硬化，因此如何延緩以及阻止腎小球硬化的進展從而保護殘存腎功能已成為慢性腎臟疾病防治和研究的重點方向，而找尋安全、無毒或低毒的相關(guān)藥物對慢性腎臟病的防治具有重要意義。有資料表明螺旋藻能延緩慢性腎衰竭的進程，但其保護機制并不清楚。本研究通過制作阿霉素致大鼠腎硬化模型，觀察螺旋藻對大鼠腎臟的保護作用并探討相關(guān)

2、的作用機制。
　　方法:
　　使用成年雄性SD大鼠32只，體重270±20g，隨機分為4組，分別為假手術(shù)組（S組）、模型對照組（M組）、貝那普利治療組（B組）和螺旋藻組(SP組);每組8只動物，其中M、B和SP三組制作成阿霉素腎硬化模型，S組同一時間段內(nèi)通過尾靜脈注射等量生理鹽水。各組均于術(shù)后1周開始給藥，SP組每天灌胃給予螺旋藻1.5g·kg-1，B組每天灌胃給予貝那普利4 mg·kg-1，而S組、M組灌胃給予等量生理鹽水

3、。術(shù)后第8周通過麻醉（心臟取血，統(tǒng)一處死各組實驗動物，留取腎臟標(biāo)本。處死動物前1天將大鼠置于代謝籠中留取24小時尿液，用以檢測24小時尿蛋白量。通過生化檢測分析各組動物24小時尿蛋白定量、血清白蛋白(Alb)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、腎臟組織病理、腎小球硬化指數(shù)(GSI);通過免疫組化的方法檢測腎臟中轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β1)、Ⅳ型膠原(ColⅣ)、纖維連接蛋白(FN)的表達;通過反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)的方法

4、檢測腎皮質(zhì)TGF-β1和纖溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）mRNA的表達。
　　結(jié)果:
　　1、24小時尿蛋白定量:B組、M組和SP組大鼠24小時尿蛋白量與S組大鼠相比有明顯增加，組間變化有顯著性差異(P＜0.01)。與M組大鼠相比，B組、SP組大鼠24小時尿蛋白量明顯減少，組間變化有顯著性差異(P＜0.01)。B組與SP組大鼠相比，24小時尿蛋白定量變化無顯著性差異（P0.05）。
　　2、血清總蛋白(TP)、血

5、清白蛋白(Alb)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN):與S組大鼠相比，M組、B組和SP組大鼠血清總蛋白(TP)、血清白蛋白(Alb)明顯減少，組間變化有顯著性差異（P＜0.01）。與S組大鼠相比，M組、B組和SP組大鼠BUN、Scr明顯增加，組間變化有顯著性差異(P＜0.05)。與M組大鼠相比，B組、SP組大鼠BUN、Scr明顯減少，組間變化有顯著性差異(P＜0.01)。B組大鼠與SP組大鼠相比血清總蛋白(TP)、血清白蛋白(Alb)、

6、BUN、Scr變化無顯著性差異（P＞0.05）。
　　3、腎臟組織病理變化:光鏡下觀察，S組大鼠腎臟結(jié)構(gòu)基本正常。M組大鼠腎臟16％的腎小球伴有節(jié)段性硬化，有4％呈現(xiàn)球性硬化。B組大鼠9％的腎小球伴有局灶性硬化，有2％呈球性硬化。SP組大鼠8％的腎小球伴有局灶性硬化，有2％呈球性硬化。B組大鼠腎臟病理改變與SP組大鼠腎臟病理變化基本一致。
　　4、腎小球硬化指數(shù):與M組大鼠相比，B組和SP組大鼠腎小球硬化指數(shù)程度明顯減輕，但

7、相較于S組大鼠腎小球硬化指數(shù)明顯加重，組間變化有顯著性差異(P＜0.01)。
　　5、免疫組化:M組、B組與SP組大鼠FN、ColⅣ、TGF-β1表達水平顯著高于S組(P＜0.01)。B組和SP組大鼠FN、ColⅣ、TGF-β1的表達水平顯著低于M組(P＜0.01)。B組與SP組大鼠FN、ColⅣ、TGF-β1的表達水平無顯著性差異（P0.05）。
　　6、RT-PCR:M組大鼠TGF-β1 mRNA和PAI-1 mRNA水

8、平顯著高于S組大鼠(P＜0.05)。B組和SP組大鼠TGF-β1 mRNA和PAI-1 mRNA水平顯著低于M組大鼠(P＜0.05)，而B組和SP組大鼠之間的變化無顯著性差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1螺旋藻能夠降低阿霉素腎病腎硬化大鼠的24小時尿蛋白與血清肌酐以及尿素氮的水平。
　　2螺旋藻可以改善阿霉素腎病腎硬化大鼠腎臟組織的病理損害。
　　3螺旋藻可以抑制阿霉素腎病腎硬化大鼠腎臟中TGF-β1蛋白