免疫球蛋白樣抑制性受體KIR基因與HLA-Cw的匹配對NK細胞活性影響的實驗研究.pdf

1、目的：探索自然殺傷(natural killer，NK)細胞免疫球蛋白樣受體(killerimmunoglobulin-like receptor，KIR)基因和HLA-Cw配體匹配數(shù)對NK細胞活性的影響；研究NK細胞KIR2DS1基因表達對AML(急性髓系白血病)靶細胞殺傷活性的影響作用及探討NK細胞KIR/HLA-Cw(human leucocyte antigen-Cw，人類白細胞抗原Cw位點)錯配的殺傷機制。 方法：采用

2、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和順序特異性引物(PCR-SSP)基因分型技術(shù)分別檢測27例健康供者及30例患者HLA-Cw、KIR基因；NK細胞磁珠分選試劑盒負向分選高純度供者來源的NK細胞作為效應(yīng)細胞；AML患者新鮮骨髓分離的單個核細胞作為靶細胞；抗CD158a，CD158b單克隆抗體封閉NK細胞KIR2DL1，KIR2DL2/3受體；MTT比色法檢測KIR受體封閉前后，KIR基因與HLA-Cw不同組合的NK細胞對AML細胞的殺傷率。 結(jié)果：

3、磁珠負選NK細胞，經(jīng)流式細胞術(shù)檢測，測的分選后CD3-/CD56+16+細胞含量為(90.8±6.08)％；NK細胞KIR基因與靶細胞HLA-Cw的匹配數(shù)少NK細胞的殺傷功能強，0個匹配的殺傷率為(50.66±8.40)％，1個匹配與2個匹配的殺傷率分別為(38.28％±6.71)％，(19.84±4.32)％，F(xiàn)=20.226，P<0.001；1個相合的KIR/HLA-Cw配對組中>50％表達抑制性KIRs的NK細胞殺傷率為10％，2

4、5％-50％的殺傷率20％，<25％殺傷率55％，F(xiàn)=16.276，p<0.001；NK細胞抑制性KIR受體封閉后，NK細胞對靶細胞的殺傷作用增強t=-3.00，P=0.005；C1組KIR2DS1+的NK細胞對C2組靶細胞的殺傷作用高于C1組及C1/C2組的靶細胞，殺傷率分別為(57.370±1.400)％、(44.190±4，666)％、(36.770±6.56)％，F(xiàn)＝11.87，P＝0.021，KIR受體封閉后差異更為明顯，F(xiàn)=