乳腺癌細胞中PRMT2靶基因的鑒定及其調(diào)控CCND1的機制研究.pdf

1、目的：檢測并分析乳腺癌細胞中蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶2（protein arginine methyltransferase2，PRMT2）的下游靶基因，檢測PRMT2表達下調(diào)后對相關(guān)蛋白表達的影響，并初步探討乳腺癌細胞中PRMT2調(diào)控細胞周期蛋白D1（Cyclin D1，CCND1）的分子機制。
　　方法：采用基因芯片技術(shù)對乳腺癌細胞中 PRMT2的下游靶基因進行檢測及分析。從基因芯片結(jié)果所檢測出的PRMT2下游靶基因中，選取較有意

2、義的靶基因，利用熒光定量PCR對其進行進一步的驗證和分析。利用Western Blot檢測乳腺癌細胞中PRMT2表達下調(diào)后對相關(guān)蛋白表達的影響，并初步探討PRMT2調(diào)控CCND1的分子機制。
　　結(jié)果：
　　1、基因芯片檢測顯示：PRMT2影響多個基因的表達，這些基因涉及多個生物過程及相應的細胞信號通路，包括：細胞生長、增殖、癌變、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、免疫應答等，其中CCND1是PRMT2的重要靶基因之一。
　　2、熒光定量PC

3、R驗證結(jié)果提示：乳腺癌細胞中PRMT2基因表達的下調(diào)導致靶基因CCND1表達的上調(diào)，且與基因芯片的結(jié)果保持一致。
　　3、Western Blot檢測蛋白的表達結(jié)果示：乳腺癌細胞中PRMT2蛋白表達下調(diào)后導致CCND1蛋白表達上升，且在雌激素(17β-estrodiol, E2)預處理后更明顯。
　　4、Western Blot檢測表明：乳腺癌細胞中PRMT2通過影響Akt/GSK-3β細胞信號通路抑制CCND1蛋白的表達。