2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、現(xiàn)在的養(yǎng)豬業(yè)規(guī)模巨大,相關(guān)動(dòng)物產(chǎn)品的使用和食用人群眾多,耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin-Resistantst Staphylococcus aureus,MRSA)的發(fā)現(xiàn)引發(fā)了各界對(duì)養(yǎng)豬業(yè)及其產(chǎn)品的普遍關(guān)注。到目前為止,由MRSA引起的人畜感染所占的比例呈逐年上升的趨勢(shì),并且常引起感染的爆發(fā)和流行、影響甚大。mecA基因是MRSA特有的耐藥基因,femA功能基因是MRSA耐藥性的輔助因子,兩者在其耐藥性中都起到了一定

2、的作用。因此本試驗(yàn)采用mecA、femA基因檢測(cè),結(jié)果陽(yáng)性則診斷為MRSA。本文旨在對(duì)從四川豬場(chǎng)采集120份樣品中分離的豬源金黃色葡萄球菌進(jìn)行PCR、擴(kuò)增mecA和femA基因。對(duì)鑒定出的豬源MRSA進(jìn)行耐藥性檢測(cè)與SCCmec分型。
  本試驗(yàn)主要研究結(jié)果如下:
  1.金黃色葡萄球菌的分離純化:2013年3月至年2013年12月期間,在四川地區(qū)12個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)采集豬鼻腔拭子、糞便樣品共計(jì)120份。采樣后接種血清瓊脂、37

3、℃培養(yǎng)18h,在平板上挑取金黃、檸檬黃或灰白色、邊緣整齊而且表面光滑的圓形菌落。革蘭氏染色、鏡檢后,接種于卵黃甘露醇高鹽瓊脂培養(yǎng)基。在35℃、培養(yǎng)24到48h,在卵黃甘露醇高鹽瓊脂培養(yǎng)基上找出呈金黃色、周?chē)幸蝗ΦS色“油煎蛋”狀暈環(huán)的單個(gè)菌落,分別接種于含有2%到4%NaCl溶液的3mLM-H肉湯中、在恒溫培養(yǎng)振蕩器中35℃純化培養(yǎng)6-8h。共計(jì)分離得到了60株金黃色葡萄球菌。
  2.MRSA的藥敏試驗(yàn):采用臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)

4、會(huì)(Clinical and LaboratoryStandards Institute,CLSI)推薦的K-B紙片法和對(duì)MRSA進(jìn)行藥敏試驗(yàn)、以金黃色葡萄球菌ATCC25923為質(zhì)控菌株,測(cè)定了分離所得的22株MRSA對(duì)4種β-內(nèi)酰胺類藥物和6種非β-內(nèi)酰胺類藥物的耐藥性。藥敏結(jié)果顯示、此次分離所得的MRSA對(duì)β-內(nèi)酰胺類藥物的耐藥率高、對(duì)非β-內(nèi)酰胺類藥物也表現(xiàn)出不同的耐藥性,主要表現(xiàn)為4、5、6耐。此次分離得到的22株MRSA細(xì)菌

5、對(duì)青霉素、頭孢氨芐、頭孢西丁、頭孢哌酮的耐藥率均為100%;對(duì)萬(wàn)古霉素、四環(huán)素均敏感;對(duì)環(huán)丙氟哌酸、紅霉素、復(fù)方新諾明和磺胺異惡唑的耐藥率分別為4.5%、4.5%、22.7%和18.2%。SCCmec基因分型結(jié)果表示,SCCmecⅣa型對(duì)非β-內(nèi)酰胺類藥物的耐藥率均為0%,而SCCmecⅠ型的5株菌對(duì)非β-內(nèi)酰胺類藥物的耐藥性相對(duì)較高。藥敏試驗(yàn)的結(jié)果表明,此次分離所得的22株MRSA菌株的多重耐藥性明顯。
  3.MRSA的PCR

6、鑒定及SCCmec分型:應(yīng)用mecA和femA基因的PCR檢測(cè)、對(duì)60株金黃色葡萄球菌進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證,將mecA和femA基因檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性者判定為MRSA。采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)對(duì)分離的MRSA進(jìn)行SCCmec基因分型。結(jié)果檢測(cè)到22株MRSA,MRSA的檢出率為18.3.%(22/120)。結(jié)果表明,四川地區(qū)豬源MRSA的主要流行類型為SCCmecⅣa型,其中SCCmecⅣa型17株、SCCmecⅠ型5株。22株MRS

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