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文檔簡介
1、目的:
探討低氧高二氧化碳性肺動脈高壓時大鼠H2S/CSE體系的變化及川芎嗪對其的干預作用。
方法:
1低氧高二氧化碳性肺動脈高壓大鼠模型復制:雄性SD大鼠30只(體重200-220g),隨機分為3組,每組10只。正常對照組(C組)、低氧高二氧化碳組(HH組)、低氧高二氧化碳+川芎嗪組(HH+LTZ)。正常對照組正常氧濃度下飼養(yǎng)4周,后兩組置于常壓低O2高CO2艙內,沖入N2使O2濃度維持在8.
2、5%-11%,CO2濃度維持在5.0%-6.5%。每天8 h,每周6 d,連續(xù)4周。低氧高二氧化碳+川芎嗪組每次低O2高CO2前1/2 h腹腔注射川芎嗪80mg.kg-1.d-1。其余兩組大鼠腹腔注射等量生理鹽水。動物飼養(yǎng)到規(guī)定時間后,麻醉動物,右心導管法測量各組平均肺動脈壓(mPAP),頸總動脈插管測量平均頸動脈壓(mCAP),分別稱量右心室游離壁(RV)和左心室加室間隔(LV+S)重量;HE染色光鏡下測量肺細小動脈管壁面積/管總面積
3、[(WA/TA)%]。以mPAP、mCAP、RV/(LV+S)%、(WA/TA)%作為判斷模型建立成功的指標。
2每只大鼠取1張肺組織石蠟切片,原位缺口末端標記(TUNEL)法測定肺細小動脈凋亡,并且計算凋亡指數(AI)。
3敏感硫電極法測定血漿H2S含量及肺組織勻漿胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性變化。
4免疫組化測肺動脈Bcl-2、Bax蛋白的表達。
5 RT-PCR法檢測肺組
4、織Bcl-2 mRNA、Bax mRNA、CSE mRNA表達。
結果:
1 HH組大鼠mPAP、RV(LV+S)%及(WA/TA)%與C組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.01),各組間MCAP無顯著差異(P>0.05)。說明低氧高二氧化碳性肺動脈高壓大鼠模型復制成功。
2 TUNEL法測得HH組的肺細小動脈AI顯著低于C組(P<0.01)。
3敏感硫電極法測得HH組血漿H2S含
5、量、肺組織勻漿CSE活性,均顯著低于C組(P均<0.01)。
4免疫組織化學法檢測HH組肺動脈Bcl-2含量顯著高于C組;肺動脈Bax的含量顯著低于C組(P均<0.01)。
5 RT-PCR法測得HH組大鼠肺組織中CSE mRNA含量顯著低于C組;肺組織Bcl-2 mRNA含量顯著高于C組;肺組織Bax mRNA含量顯著低于C組(P均<0.01)。
6 HH+LTZ組大鼠mPAP、RV/(LV+
6、S)%及(WA/TA)%較HH組均明顯降低(P均<0.01)。HH+LTZ組肺動脈Bcl-2的含量,肺組織Bcl-2 mRNA的表達顯著低于HH組;HH+LTZ組肺動脈Bax的含量,肺組織Bax mRNA的表達顯著高于于HH組(P均<0.01)。HH+LTZ組肺細小動脈凋亡指數高于HH組(P<0.05)。血漿H2S含量、肺組織勻漿CSE活性、肺組織CSE mRNA含量,HH+LTZ組均顯著高于HH組(P均<0.01)。
結
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