“雙固一通”針法對(duì)家兔急性心肌缺血損傷的保護(hù)作用及其電生理機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討“雙固一通”針法對(duì)家兔急性心肌缺血(AMI)的保護(hù)作用及其抗AMI損傷的電生理機(jī)制。 方法：健康清潔級(jí)日本大耳白兔60只，隨機(jī)分為三組：正常組(假手術(shù)對(duì)照，不造模不針刺，分為兩小組，每小組10只：迷走神經(jīng)完整組和迷走神經(jīng)切斷組)、模型組(只造模不針刺，分為兩小組，每小組10只：迷走神經(jīng)完整組和迷走神經(jīng)切斷組)、“雙固一通”針法電針組(造模后電針關(guān)元、足三里、內(nèi)關(guān)，分為兩小組，每小組 10只：迷走神經(jīng)完整組和迷走神經(jīng)切斷

2、組)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用20％烏拉坦(5mL/kg)行耳緣靜脈注射麻醉后，結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支制造急性心肌缺血(AMI)模型，以“雙固一通”針法電針刺激治療。所有迷走神經(jīng)完整組家兔實(shí)驗(yàn)中分別于結(jié)扎前、結(jié)扎即刻、結(jié)扎后15min、30min、45min、60min等時(shí)刻同步記錄心電圖、動(dòng)脈血壓、心肌細(xì)胞跨膜動(dòng)作電位，于延髓腹外側(cè)區(qū)頭端(RVLM)記錄神經(jīng)元放電，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取心臟以氯化硝基唑藍(lán)染色計(jì)算心肌缺血范圍，采用免疫組化SABC法檢測(cè)心肌細(xì)胞

3、FOS蛋白陽性細(xì)胞，測(cè)定其陽性細(xì)胞表達(dá)率；所有迷走神經(jīng)切斷組除同步記錄心電圖、動(dòng)脈血壓等指標(biāo)外，切斷迷走神經(jīng)后分別記錄迷走神經(jīng)傳入纖維和傳出纖維的放電，測(cè)定其放電頻率和幅度。 結(jié)果： 1.心電圖：與正常組相比，模型組和電針組家兔心電圖ST段電位顯著抬高、T波高聳(P<0.01)，與結(jié)扎前比較差異有顯著改變(P<0.01)，模型組ST段變化在冠脈結(jié)扎后15min時(shí)達(dá)到高峰，隨后在整個(gè)觀察期變化不明顯，而“雙固一通”針法電針

4、組sT段電位恢復(fù)較模型組有顯著性差異(P<0.05)。 2.平均動(dòng)脈血壓：與正常組相比，模型組和電針組家兔動(dòng)脈血壓下降(P<0.01)。模型組血壓的變化在冠脈結(jié)扎后15min時(shí)最為顯著，隨后動(dòng)脈血壓有所恢復(fù)，“雙固一通”針法電針組血壓恢復(fù)較快，在結(jié)扎后45min后就與最高峰有顯著性差異(P<0.05)，60min后血壓與結(jié)扎前已無明顯差異(P>0.05)。 3.心肌細(xì)胞跨膜電位：與正常組相比，模型組和電針組在結(jié)扎后APA

5、顯著減小，APD50、APD90顯著縮短(P<0.01)。模型組在結(jié)扎后15min時(shí)APA、APD50、APD90變化最顯著；“雙固一通”針法電針組動(dòng)作電位恢復(fù)較快，在結(jié)扎后45min與模型組已有顯著性差異(P<0.05)。 4.心肌組織缺血梗死范圍：心肌組織切片染色后計(jì)算心肌缺血范圍結(jié)果顯示，“雙固一通”針法電針組心肌缺血梗塞缺血范圍明顯縮小，與模型組比較有顯著性差異(P<0.01)。 5.迷走神經(jīng)放電：與正常組比較，

6、模型組和電針組在心肌結(jié)扎缺血后，心率減慢，心電圖ST段顯著抬高、T波高聳(P<0.01)。模型組各指標(biāo)在整個(gè)觀察其均長(zhǎng)時(shí)間維持。迷走神經(jīng)切斷后，“雙固一通”針法電針依然能促進(jìn)心率、ST段的恢復(fù)，結(jié)扎后60min，可見電針組與模型組比較具有顯著性差異(P<0.05)。 模型組傳入纖維的放電頻率和峰值在觀察期內(nèi)無明顯改變(P>0.05)；切斷迷走神經(jīng)后，“雙固一通”針法電針組傳入纖維的放電頻率和峰值變化也不明顯(P>0.05)。模型

7、組和電針組結(jié)扎后迷走神經(jīng)傳出纖維的放電頻率、幅值稍有加大?！半p固一通”針法電針組使迷走神經(jīng)傳出纖維放電頻率增加，放電峰值增大，與模型組比較有顯著性差異(P<0.05)。 6.c-fos基因蛋白表達(dá)：光鏡觀察顯示，心肌缺血周圍區(qū)細(xì)胞變化，缺血中央?yún)^(qū)心肌細(xì)胞可見水腫，胞內(nèi)空泡，胞核變小。缺血中央?yún)^(qū)心肌組織FOS陽性率顯著高于心肌缺血周圍區(qū)(P<0.01)，“雙固一通”針法電針后使FOS陽性率顯著減小(P<0.05)． 7.R

8、LVM神經(jīng)元放電：通過細(xì)胞外記錄的方法，在RVLM記錄到33個(gè)神經(jīng)元的自發(fā)放電活動(dòng)，24個(gè)神經(jīng)元在結(jié)扎后自發(fā)放電頻率增加，“雙固一通”針法電針組能抑制缺血引起的RVLM神經(jīng)元活動(dòng)增強(qiáng)，在電針45min后RLVM神經(jīng)元放電頻率顯著降低(P<0.05)。 結(jié)論： 1.“雙固一通”針法能促進(jìn)家兔AMI損傷時(shí)心率、心電圖ST段的恢復(fù)，改善AMI時(shí)動(dòng)脈血壓的變化。 2.“雙固一通”針法能改善AMI損傷時(shí)心肌細(xì)胞跨膜電位的變

9、化，調(diào)整心肌細(xì)胞膜離子通透性和電學(xué)穩(wěn)定性，降低心律失常的發(fā)生。 3.“雙固一通”針法對(duì)缺血心肌具有保護(hù)作用，減小心肌缺血梗塞范圍，減少缺血后c-fos蛋白的表達(dá)，降低心肌組織損傷的程度． 4.“雙固一通”針法能通過加強(qiáng)外周迷走神經(jīng)的張力，增加迷走神經(jīng)傳出纖維的放電發(fā)揮抗心肌缺血作用。 5.“雙固一通”針法能抑制AMI時(shí)RVLM神經(jīng)元的放電活動(dòng)，促進(jìn)心肌缺血的恢復(fù)，提示其抗AMI損傷的中樞機(jī)制可能與RVLM途徑有關(guān)