香茹多糖注射制劑質(zhì)量標準的系統(tǒng)化研究.pdf

1、香菇多糖是菌類多糖中的一種。1985年日本最先批準香菇多糖作為抗癌新藥上市，主要用于惡性腫瘤的輔助治療。研究表明香菇多糖在抗胃癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、肺癌等方面有良好的療效，能夠延長腫瘤患者的存活時間。近年來發(fā)現(xiàn)香菇多糖還有抗病毒和抗感染的功能。1995年，我國國產(chǎn)的香菇多糖注射制劑批準進入臨床應(yīng)用?，F(xiàn)在市場上銷售的國產(chǎn)香菇多糖注射制劑包括注射液與注射用無菌粉末兩種。香菇多糖注射液全國有1個企業(yè)生產(chǎn)，2個批準文號(分別為中藥與化藥注射液)，

2、執(zhí)行標準為WS3-149(Z-29)-95(Z)和WS-1071(X-806)-2002；注射用香菇多糖，全國共4個企業(yè)生產(chǎn)、4個批準文號，執(zhí)行標準為WS1-(X-152)-2004Z。原料藥名稱相同生產(chǎn)的注射劑卻執(zhí)行不同的標準，有的按照中藥管理，有的按照化藥管理，可控性差，加之現(xiàn)行的香菇多糖注射制劑質(zhì)量標準已經(jīng)執(zhí)行多年，檢查項目較少，部分分析方法陳舊，因此有必要通過改進檢驗方法和增加檢驗項目，建立更加完善的質(zhì)量標準，確保安全、有效、穩(wěn)

3、定、可控的香菇多糖注射制劑用于臨床。
　　 本文根據(jù)《中國藥典》和相關(guān)文獻，以色譜技術(shù)為主要研究手段，對香菇多糖注射制劑的質(zhì)量標準進行系統(tǒng)化研究。
　　 一、現(xiàn)行香菇多糖注射制劑質(zhì)量標準中含量測定方法的改進
　　 現(xiàn)行的質(zhì)量標準中，香菇多糖注射液(中藥)和注射用香菇多糖的含量測定方法是滴定法。本文采用操作簡便，誤差更小的蒽酮比色法作為香菇多糖注射液(中藥)和注射用香菇多糖的含量測定方法；本文還研究了用HPLC-R

4、ID來測定制劑中香菇多糖的含量，該法雖然可以避免香菇多糖注射制劑中輔料的干擾，但因現(xiàn)階段沒有香菇多糖的標準品，使用葡聚糖作為標準品來進行含量測定有一定誤差。
　　 二、現(xiàn)行香菇多糖注射制劑質(zhì)量標準外項目的研究
　　 (1)現(xiàn)行的質(zhì)量標準中缺少對香菇多糖分子量的檢查項目，而研究表明[1，2]，香菇多糖的抗腫瘤活性與其分子量密切相關(guān)。本文采用HPLC-RID對香菇多糖注射制劑的分子量分布進行測定，結(jié)果表明，香菇多糖注射制劑的

5、分子量分布差別很大。
　　 (2)多糖的單糖組成分析是研究多糖結(jié)構(gòu)、活性及構(gòu)效關(guān)系的一項重要內(nèi)容。本文采用HPLC-RID測定香菇多糖水解后的單糖組成，結(jié)果表明，不同制劑的香菇多糖單糖組成差別較大。
　　 (3)根據(jù)《中國藥典》2010版二部附錄ⅧP，香菇多糖原料的生產(chǎn)純化過程中用到的三氯甲烷(第二類溶劑)、正丁醇(第三類溶劑)和乙醇(第三類溶劑)殘留量超標會對人體造成危害。本文采用GC對香菇多糖注射制劑中溶劑殘留的含量

6、進行檢測，結(jié)果表明，香菇多糖注射制劑中未檢出殘留溶劑。
　　 (4)苯甲醇常在注射液中用作止痛劑和防腐劑，但如果攝入過量有溶血等副作用，會對人體造成危害。香菇多糖注射制劑中只有香菇多糖注射液(中藥)處方中含有苯甲醇。本文采用HPLC-DAD測定了香菇多糖注射制劑中苯甲醇的含量，結(jié)果表明，只有香菇多糖注射液(中藥)中檢測到苯甲醇并確定了含量限度范圍。
　　 (5)香菇多糖是由葡萄糖等單糖聚合而成的多糖，在水中難溶，注射液生

7、產(chǎn)時常需加入增溶劑。5-HMF是葡萄糖等單糖化合物在制備過程中經(jīng)高壓滅菌后分解產(chǎn)生的一個醛類化合物，會對人體橫紋肌和內(nèi)臟有損害；吐溫80是注射液常用的增溶劑，但具有很強的刺激性、溶血性和致敏性，本文采用HPLC-UV對香菇多糖注射制劑中5-HMF、吐溫80進行檢測，結(jié)果表明，香菇多糖注射制劑中未檢測到5-HMF和吐溫80。
　　 (6)根據(jù)《中國藥典》2010年版(附錄ⅨG)，處方中添加了滲透壓調(diào)節(jié)劑的制劑，均應(yīng)控制其滲透壓摩爾

8、濃度。本文采用冰點下降法對香菇多糖注射制劑的摩爾滲透壓進行測定，結(jié)果顯示，不同香菇多糖注射制劑的摩爾滲透壓有差異。
　　 (7)研究表明，重金屬及有害元素攝入過多對人有危害，而藥品原材料、輔料及生產(chǎn)設(shè)備中的重金屬元素可能進入到注射制劑中，因此有必要限制對制劑的重金屬元素的含量。本文采用ICP-MS測定香菇多糖注射制劑中多種金屬元素的含量，并制定了香菇多糖注射制劑中的重金屬及有害元素含量限度標準。
　　 三、腹腔內(nèi)注射香菇

9、多糖注射制劑對小鼠免疫調(diào)節(jié)功能的影響
　　 單核巨噬細胞系統(tǒng)在免疫調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用，對機體內(nèi)異體顆粒、病原體及腫瘤細胞等具有強大而迅速的非特異性吞噬廓清能力，而研究發(fā)現(xiàn)香菇多糖的免疫調(diào)節(jié)功能與分子量大小有關(guān)，因此測定單核巨噬細胞系統(tǒng)功能可以表征香菇多糖的藥理活性。本文通過比較小鼠給藥后碳粒廓清功能強弱，反映了香菇多糖注射制劑對單核巨噬細胞功能的影響大小，結(jié)果顯示，分子量88萬Da的注射用香菇多糖的免疫調(diào)節(jié)功能強于分子量32萬Da