中藥延胡索質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化及制劑研究.pdf

1、延胡索為罌粟科(Papaveraceae)紫堇屬植物(Corydalis DC)延胡索(Corydalis yanhusuo W．T．Wang)的干燥塊莖，始載于唐《本草拾遺》，在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中有兩千多年的歷史，其味辛能行氣、行血，性溫則能通，廣泛用于血瘀氣滯、心腹及肢體疼痛等，被列為《止痛中藥》中重點(diǎn)研究的課題之一。 本文在文獻(xiàn)調(diào)研的基礎(chǔ)上，為系統(tǒng)研究延胡索化學(xué)成分及有效部位，同時為了有效控制其質(zhì)量，從以下幾個方面進(jìn)行了研究，結(jié)果

2、摘要如下： 1.通過對延胡索系統(tǒng)的化學(xué)研究，分離得到7個化合物，并通過理化常數(shù)、核磁及質(zhì)譜等測定，確定為紫堇堿、四氫黃連堿、四氫巴馬亭、四氫非洲防己胺、四氫小檗堿、原阿片堿、脫氫海罌粟堿。經(jīng)TLC、HPLC法測定7個化合物的純度，均在95％以上，其中原阿片堿、四氫非洲防己胺、四氫巴馬亭和紫堇堿的純度可達(dá)99％，可用于延胡索藥材、延胡索提取物及有關(guān)制劑的全面質(zhì)量研究。 2.采用HPLC法建立了延胡索藥材HPLC指紋圖譜，并

3、進(jìn)行了指紋圖譜的方法學(xué)研究，標(biāo)定了12個共有峰，對其中的8個峰進(jìn)行了歸屬確認(rèn)。另對25批延胡索進(jìn)行指紋圖譜測定及相似度評價，其中少數(shù)樣品與對照藥材質(zhì)量差異較大，判定為偽品，其他大部分市售品與對照藥材一致，表明目前市售樣品基本能夠滿足臨床使用要求，認(rèn)為延胡索中化學(xué)成分的組成和相對含量是影響其質(zhì)量的關(guān)鍵。 3.以70％乙醇為溶劑，通過提取，并經(jīng)酸處理及乙酸乙酯萃取制得延胡索總生物堿有效部位，經(jīng)滴定法測得有效部位中總堿的含量為63.5

4、％，符合有效部位的有關(guān)規(guī)定。采用HPLC法，建立了延胡索中4種典型生物堿(紫堇堿、四氫巴馬亭、原阿片堿、四氫非洲防己胺)同時測定進(jìn)行含量的方法，有效部位中的含量分別為13.0％、5.80％、3.63％、3.85％。在以上研究基礎(chǔ)上，參照中國藥典(2005版)，制定了延胡索有效部位的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案。上述研究結(jié)果為完善及修訂延胡索藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了依據(jù)。 4.以小鼠醋酸扭體為模型，對總堿部位A及B進(jìn)行了鎮(zhèn)痛活性篩選及指紋圖譜測定，結(jié)果

5、表明，總堿部位B為季胺類生物堿，在281nn檢測波長下，指紋圖譜中未有體現(xiàn)，且相同生藥量條件下，也未顯示出鎮(zhèn)痛活性；而總堿部位A的鎮(zhèn)痛活性與延胡索原粉相當(dāng)，進(jìn)一步提示，總堿部位A是延胡索鎮(zhèn)痛活性的有效部位，此部分化合物在指紋圖譜中集中于保留時間為30-75min內(nèi)的區(qū)域。 延胡索指紋圖譜上30～75min是叔胺堿的出峰區(qū)域，主要有紫堇堿、四氫黃連堿、四氫巴馬亭、四氫非洲防己胺、四氫小檗堿、脫氫海罌粟堿等化合物。首次提出以紫堇堿、

6、四氫黃連堿、四氫巴馬亭、四氫非洲防己胺、四氫小檗堿、脫氫海罌粟堿等化合物組成的指紋圖譜區(qū)域是延胡索指紋圖的活性區(qū)域，該區(qū)域與延胡索的鎮(zhèn)痛作用密切相關(guān)，是延胡索鎮(zhèn)痛活性成分在HPLC指紋圖譜中的特征性體現(xiàn)，需要關(guān)注的是此類化學(xué)成分的組成和比例是延胡索質(zhì)量評價的重要指標(biāo)。 小鼠灌胃給藥的急性毒性試驗(yàn)表明，延胡索有效部位的最大耐受量約為85mg·kg<'-1>，半數(shù)致死量接近125mg·kg<'-1>；在1.6～40mg·kg<'-1

7、>范圍內(nèi)，延胡索有效部位的劑量與效應(yīng)呈正相關(guān)，建議人用臨床劑量為65mg/天。 5.以HPLC指紋圖譜為指導(dǎo)，以延胡索為范例，首次提出了建立在譜效學(xué)基礎(chǔ)上的延胡索所有有效成分的合理勾兌，并建立了中藥材勾兌流程，如下：①對各批次藥材進(jìn)行指紋圖譜測定；②確定勾兌目標(biāo)和勾兌對象；③通過系統(tǒng)優(yōu)化確定最佳勾兌比例；④勾兌驗(yàn)證。研究表明，基于HPLC指紋圖譜的中藥勾兌是得到質(zhì)量穩(wěn)定一致原藥材的科學(xué)方法，是保證中藥產(chǎn)品質(zhì)量的有效途徑之一，符合

8、中藥現(xiàn)代化發(fā)展需要，對生產(chǎn)和科研具有重要指導(dǎo)意義，為中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化研究提供了一個切實(shí)可行的范例。 6.采用現(xiàn)代制劑技術(shù)，①延胡索有效部位．Poloxamer188(1：4)，溶劑法制備固體分散體；②固體分散體-MCC(4：1)，以5％PVPK<,30>為粘合劑，離心造粒法制備微丸；該微丸在30min內(nèi)溶出完全，10min時溶出百分率為85％，提示具有良好的速釋性能，其速效性有待進(jìn)一步的體內(nèi)研究。該制劑工藝簡便可行、重復(fù)性好，適于