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1、弓形蟲慢性感染時(shí)導(dǎo)致體內(nèi)大量的抗炎癥介質(zhì)的合成,本實(shí)驗(yàn)在證明術(shù)前慢性弓形蟲感染的受者延長(zhǎng)移植心臟存活時(shí)間的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步研究抗炎癥介質(zhì)脂氧素A4對(duì)心臟移植的保護(hù)作用,并且對(duì)其機(jī)制作初步研究。 目的:探討抗炎癥介質(zhì)脂氧素A4對(duì)小鼠心臟移植物急性排斥反應(yīng)的影響,對(duì)混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)中淋巴細(xì)胞的增殖和凋亡的影響,以及對(duì)脾細(xì)胞輸注誘導(dǎo)的GVHD的影響。 方法:建立小鼠頸部異位心臟移植模型,實(shí)驗(yàn)小鼠分為A、B、C、D四組,每組7只。
2、A、B分別為脂氧素A4組和生理鹽水對(duì)照組,供者為BALB/C、受者為C57BL/6,術(shù)后0,2,4分別靜脈注射1ug脂氧素A4和等量的生理鹽水。C、D組分別為同系對(duì)照組,C組供受者均為BALB/C小鼠、D組供受者均為C57BL/6小鼠。術(shù)后觀察小鼠的一般情況(體重,精神狀態(tài)),第7天處死受鼠,取移植心臟及受者血清,觀察移植物病理變化,檢測(cè)血清中細(xì)胞因子的變化。同時(shí)在體外建立混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系,使用脂氧素A4進(jìn)行干預(yù),分別使用alama
3、rBlueTM和流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)其淋巴細(xì)胞增殖和凋亡。在體內(nèi)建立脾細(xì)胞輸注誘導(dǎo)GVHD模型,在第0和7天靜脈輸注108個(gè)C57BL/6小鼠脾細(xì)胞到F1代體內(nèi),實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組各6只,實(shí)驗(yàn)組脾細(xì)胞使用LXA4預(yù)處理(1ug/108個(gè))30min,對(duì)照組未處理,觀察其一般狀況(體重,皮毛),第14天處死受鼠,觀察肝、腎、肺等病理切片,檢測(cè)血清肝功能。 結(jié)果:小鼠心臟移植術(shù)后脂氧素組的精神狀態(tài)及體重下降明顯好于B組,和C,D組相似。A
4、~D各組術(shù)后7天移植物排斥分級(jí)依次為:1級(jí)、3.1±0.6級(jí)、0級(jí)、0級(jí),A組浸潤(rùn)炎性細(xì)胞較B組明顯減少,血清中細(xì)胞因子向TH2偏移。在體外實(shí)驗(yàn)中脂氧素對(duì)淋巴細(xì)胞增殖和凋亡無明顯影響。脂氧素A4在脾細(xì)胞輸注誘導(dǎo)GVHD模型中,可以明顯改善受鼠的一般狀況,減輕GVHD反應(yīng),改善受鼠的肝功能。 結(jié)論:脂氧素A4能減輕急性排斥反應(yīng),減少移植物炎性細(xì)胞滲出,并且能夠改善術(shù)后小鼠的一般狀況,引起血清中細(xì)胞因子向TH2偏移,但是在本實(shí)驗(yàn)濃度
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