脂氧素A4在椎間盤(pán)突出所致大鼠根性神經(jīng)痛中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、背景：
　　根性神經(jīng)痛是椎間盤(pán)突出癥最常見(jiàn)的癥狀，疼痛劇烈，遷延難愈，極大的影響患者的生活質(zhì)量。研究表明，除機(jī)械壓迫因素外，突出髓核(Nucleus Pulposus，NP)組織與神經(jīng)根非壓迫性接觸所誘發(fā)的炎癥反應(yīng)也是根性神經(jīng)痛的重要原因，是近年來(lái)備受關(guān)注的醫(yī)學(xué)熱點(diǎn)。髓核的致炎特性是誘發(fā)非壓迫致痛的重要機(jī)制。髓核作為“隔離抗原”存在，一旦突出暴露于免疫系統(tǒng)，即可激發(fā)機(jī)體自身免疫反應(yīng)，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)，中性粒細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞等炎性細(xì)胞

2、募集、增殖，釋放各種溶酶、炎癥細(xì)胞因子（如IL-1β、IL-6、TNF-α、前列腺素等），引起神經(jīng)根腫脹，空泡變性，從而導(dǎo)致根性神經(jīng)痛。
　　脂氧素(lipoxins，LXs)是體內(nèi)重要的內(nèi)源性促炎癥消退介質(zhì)，為炎癥反應(yīng)的重要“剎車信號(hào)”，是花生四烯酸在脂加氧酶的作用下通過(guò)跨細(xì)胞途徑合成，對(duì)多種炎癥細(xì)胞和炎癥因子有顯著的負(fù)性調(diào)節(jié)作用。目前脂氧素促進(jìn)炎癥消退的作用已在急性肺損傷、哮喘、腎纖維化等疾病中得到證實(shí)，然而卻很少有研究涉及其

3、在椎間盤(pán)突出癥所致根性神經(jīng)痛中的作用。本研究擬通過(guò)建立非壓迫性椎間盤(pán)突出癥大鼠模型，通過(guò)鞘內(nèi)給藥的方式探討脂氧素在根性神經(jīng)痛中的作用及機(jī)制。
　　目的：
　　本研究擬通過(guò)建立非壓迫性椎間盤(pán)突出癥大鼠模型，通過(guò)鞘內(nèi)給藥的方式探討脂氧素A4在根性神經(jīng)痛中的作用及機(jī)制。
　　方法：
　　1.建立大鼠非壓迫性椎間盤(pán)突出癥模型，并于術(shù)后連續(xù)3天鞘內(nèi)注射脂氧素A4或生理鹽水10μl。根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件不同，將72只大鼠隨機(jī)分為4組

4、:假手術(shù)組（假手術(shù)+10μl生理鹽水）、模型組（模型+10μl生理鹽水）、脂氧素A410ng組（模型+10 ng脂氧素A4）、脂氧素A4100ng組（模型+100 ng脂氧素A4），每組18只。
　　2.于術(shù)前1天及術(shù)后7天連續(xù)觀察大鼠行為學(xué)變化并測(cè)定術(shù)側(cè)機(jī)械痛50％PWT。然后處死大鼠取術(shù)側(cè)脊髓背角(L4-L6)，分別利用ELISA和PCR技術(shù)檢測(cè)脊髓背角炎性因子（TNF-α、IL-1β、TGF-β1和IL-10）的表達(dá)。此外，

5、采用Western blot檢測(cè)術(shù)側(cè)脊髓背角NF-κB/p65和MAPK(ERK、JNK和P38)蛋白通路的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　與假手術(shù)組比較，模型組大鼠的50％PWT明顯降低(p＜0.05);與模型組比較，脂氧素A410ng組和脂氧素A4100ng組術(shù)后各觀測(cè)點(diǎn)50％PWT明顯升高(p＜0.05)。與假手術(shù)組比較，模型組TNF-α、IL-1β的蛋白和mRNA含量明顯升高而TGF-β1的蛋白和mRNA含量明顯降低(p＜0

6、.05)，IL-10的蛋白含量明顯降低(p＜0.05);與模型組比較，脂氧素A410ng組和脂氧素A4100ng組TNF-α、IL-1β的蛋白和mRNA含量明顯降低而TGF-β1的蛋白和mRNA含量明顯升高(P＜0.05)，IL-10的蛋白含量明顯升高(p＜0.05)，且呈劑量依賴性。與假手術(shù)組比較，模型組NF-κB/p65，p-ERK， p-JNK和p-p38水平明顯升高(p＜0.05);與模型組比較，脂氧素A410ng組和脂氧素A4

7、100ng組NF-κB/p65，p-ERK和p-JNK水平明顯降低(p＜0.05)，且呈劑量依懶性，但p-p38水平無(wú)明顯變化(p＞0.05)。
　　結(jié)論：
　　鞘內(nèi)注射脂氧素A4能夠減輕非壓迫性椎間盤(pán)突出癥大鼠的根性神經(jīng)痛，其機(jī)制可能與抑制NF-κB/p65、ERK和JNK的活性并下調(diào)促炎因子(TNF-α和IL-1β)和上調(diào)抗炎因子(TGF-β1和IL-10)的表達(dá)有關(guān)。因此，脂氧素A4為椎間盤(pán)突出癥的治療提供新的思路和實(shí)