胃食管反流和支氣管哮喘的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探討胃食管反流能否導(dǎo)致類似哮喘樣病理生理變化及發(fā)生機(jī)制
　　方法：選擇60只周齡為6～8的雄性BALB／c小鼠，采用隨機(jī)分組的方法將這60只小鼠分為4組，每組小鼠為15只：A組(胃食管反流對(duì)照組）、B組（哮喘對(duì)照組）、C組（胃食管反流組）、D組(哮喘組）。C組,從第1天開(kāi)始用灌胃器緩慢灌注0.1mmol/L鹽酸+0.5％胃蛋白酶溶液，Ph值3，每次灌胃1ml，每天一次，連續(xù)21天。D組，用新鮮配制的20μg卵清蛋白（oval

2、bumin,OVA）+1mg氫氧化鋁共0.2ml于第1、8、15天腹腔注射一次致敏，第22天開(kāi)始霧化吸入2%OVA生理鹽水溶液，每天吸入1次，每次30分鐘連續(xù)7天。A組用生理鹽水進(jìn)行灌胃。B組用生理鹽水進(jìn)行腹腔注射和霧化吸入。
　　卵清蛋白攻擊結(jié)束1周后再次給予OVA（10mg/ml）生理鹽水溶液霧化吸入30分鐘，與灌胃組小鼠在末次灌胃后，24小時(shí)內(nèi)用組胺進(jìn)行支氣管激發(fā)試驗(yàn)，并測(cè)定每組小鼠的氣道阻力變化，觀察是否產(chǎn)生氣道高反應(yīng)性；

3、進(jìn)行肺泡灌洗液涂片，鏡下計(jì)數(shù)肺泡灌洗液中嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞所占的百分比；采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定脾臟細(xì)胞中 IL-4、IFN-γ，Th1/Th2比值的變化；肺組織以及食管病理切片經(jīng)HE染色后觀察病理形態(tài)變化。
　　結(jié)果：①進(jìn)行氣道阻力檢測(cè)后，A、B組的小鼠均未發(fā)生氣道高反應(yīng)性，C、D組在行支氣管激發(fā)試驗(yàn)后氣道阻力比值比A、B組增高，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），C、D組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。②4組小鼠I

4、L-4值得比較，C、D組小鼠IL-4較A、B組明顯增高，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），C、D組之間,A、B組之間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。③C、D組小鼠IFN-γ較A、B組明顯降低，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），C、D組之間,A、B組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。④C、D組小鼠Th1/Th2比值明顯下降，與A、B組比較具有差異性，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。C、D組之間,A、B組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞

5、0.05）。⑤4組小鼠BALF中EOS數(shù)占細(xì)胞總數(shù)百分比比較，A、B組 BALF中僅偶見(jiàn)單個(gè)嗜酸性粒細(xì)胞，C、D組可見(jiàn)大量的嗜酸性粒細(xì)胞。與A、B組相比較，C、D組中EOS數(shù)占細(xì)胞總數(shù)百分比明顯增多,比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。C組與D組相比較，D組中EOS數(shù)占細(xì)胞總數(shù)百分比有所升高，但無(wú)統(tǒng)計(jì)差異性（P>0.05）。A組、B組、C組、D組四組之間相互比較中性粒細(xì)胞百分比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑥肺組織病理切片中可以觀察