Reelin和B7-H3分子在多發(fā)性骨髓瘤中的表達及預后意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：通過研究骨髓瘤細胞株及多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)患者CD138+骨髓瘤細胞中Reelin和B7-H3分子的表達水平，并與臨床資料相結合分析，探索Reelin和B7-H3分子在多發(fā)性骨髓瘤中的預后意義。
　　方法：1.Reelin的檢測(1)骨髓瘤細胞株中Reelin的檢測:RT-PCR方法檢測3種細胞株Reelin分子的表達，GAPDH為內參對照;(2)MM患者CD138+骨髓瘤細胞中Reelin

2、的檢測:提取骨髓中單個核細胞(Mononuclear cells，MC)，標記CD138 PE抗體，流式分選出CD138+骨髓瘤細胞，行實時定量PCR，以骨髓瘤細胞株Reelin表達量為對照，檢測Reelin的相對表達量。2.B7-H3的檢測(1)骨髓瘤細胞株B7-H3的檢測:RT-PCR方法檢測細胞株B7-H3分子的表達，GAPDH作為內參對照;細胞株標記Anti-Human B7-H3 PE抗體，流式檢測B7-H3陽性率，設立Ant

3、i-IgG1-PE為同型對照;IL-6刺激細胞株B7-H3的檢測;重組人IL-6刺激骨髓瘤細胞株72小時，標記B7-H3 PE抗體，流式檢測，Anti-IgG1-PE為同型對照;(2)MM患者CD138+骨髓瘤細胞中B7-H3的檢測:提取MC，標記B7-H3PE和CD138 APC抗體，流式檢測CD138+B7-H3+、CD138+B7-H3-分子的表達比例。3.Reelin與B7-H3分子在MM患者CD138+骨髓瘤細胞中表達的相關性

4、分析。
　　結果：1.骨髓瘤細胞株H929高表達Reelin，RPMI8226和U266低表達Reelin;而B7-H3恰相反;外源IL-6刺激骨髓瘤細胞株未見B7-H3分子的上調。2.MM患者骨髓中能分選出一定量的CD138+骨髓瘤細胞，且Reelin和B7-H3在患者中差異性表達。3.CD138+骨髓瘤細胞比例與Reelin表達水平無相關性(r=0.179，P=0.345)。不同病程組間及組內Reelin表達無統(tǒng)計學差異(P=

5、0.209);CD138+骨髓瘤細胞Reelin的表達與年齡、性別、分期及是否髓外病變差異無統(tǒng)計學意義，與預后（無疾病進展期）有統(tǒng)計學意義(P=0.033)。4.流式檢測初診與緩解MM的B7-H3陽性率差異有統(tǒng)計學意義（P=0.023）;緩解與復發(fā)的B7-H3陽性率差異有統(tǒng)計學意義(P=0.004);B7-H3高表達較低表達的患者具有更多的骨質破壞(P=0.027)，血清鈣離子差異有統(tǒng)計學意義(P=0.046)。5.Reelin與B7-

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