OPN、NF-κB、IκB-α及MMP-9與食管癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究.pdf

1、目的：本研究通過(guò)對(duì)食管癌組織中轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白-骨橋蛋白(OPN)以及細(xì)胞核因子кB(NF-кB)、IкB-α、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)的表達(dá)及OPNmRNA的檢測(cè)，探討OPN、NF-кB、IкB-α及MMP-9與食管癌的發(fā)生、分化、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的關(guān)系；并分析OPN、NF-кB、IкB-α及MMP-9四者之間相關(guān)性。 方法 1 應(yīng)用(immunohistochemistry,IHC)方法檢測(cè)了45例食管鱗癌組織，21例

2、不典型增生組織，24例正常的食管粘膜上皮組織中OPN、NF-кB、IкB-α、MMP-9蛋白的表達(dá)。 2 應(yīng)用原位雜交技術(shù)(In situ hybridization,ISH)檢測(cè)了45例食管鱗癌組織，21例不典型增生組織，24例正常的食管粘膜上皮組織中OPNmRNA的表達(dá)。 3 應(yīng)用流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)(Flow cytometry,FCM)對(duì)27例食管鱗狀細(xì)胞癌，10例不典型增生組織和8例正常組織中的OPN蛋白表達(dá)進(jìn)行定量

3、檢測(cè)。 結(jié)果 1 OPN在食管上皮不同病變中的表達(dá)。1．1 免疫組織化學(xué)檢測(cè)采用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)45例食管癌組織、21例不典型增生組織、24例正常組織中 OPN蛋白的檢測(cè)結(jié)果顯示：OPN蛋白在癌組織中的表達(dá)(84.4％)明顯高于不典型增生組織(47.6％)和正常組織(12.5％)，三者差別有顯著意義(P<0.05)；OPN蛋白的表達(dá)與食管鱗癌患者年齡、性別及腫瘤的分化程度無(wú)關(guān)(P>0.05)；與食管癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移成正相

4、關(guān)(P<0.05)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織的OPN蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率(96.0％)明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織(70.0％)；與腫瘤浸潤(rùn)深度成正相關(guān)(P<0.05)，浸及纖維膜的癌組織的陽(yáng)性表達(dá)(93.1％)明顯高于未浸及纖維膜的癌組織(68.8％)。 1.2 原位雜交技術(shù)檢測(cè)采用原位雜交技術(shù)檢測(cè)45例食管癌組織、21例不典型增生組織、24例正常組織中OPNmRNA的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，OPNmRNA在癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)(77.8％)明顯高于

5、不典型增生組織(57.1％)和正常組織(813％)；三者之間差異顯著(P<0.05)。OPNmRNA表達(dá)與患者年齡、性別及腫瘤的分化程度無(wú)關(guān)(P>0.05)；與食管癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移成正相關(guān)(P<0.05)；與腫瘤浸潤(rùn)深度成正相關(guān)(P<0.05)。此結(jié)果與免疫組化的檢測(cè)結(jié)果相一致。 1.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)27例癌組織，10例不典型增生組織，8例正常組織中OPN蛋白表達(dá)量(FI值)檢測(cè)的結(jié)果顯示：OPN在癌組織中的表達(dá)

6、(1.54±0.18)明顯高于不典型增生組織(1.13±0.15)和正常組織(1.00±0.08)，三者差別有顯著意義(P<0.05)；且在有、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管鱗癌組織之間及有無(wú)纖維膜浸潤(rùn)的食管癌組織之間的OPN蛋白表達(dá)量(FI值)均具有明顯差異(P<0.05)；但OPN蛋白的表達(dá)量(FI值)在高、中、低分化的食管鱗癌組織之間及性別和年齡之間無(wú)關(guān)性(P>0.05)，此結(jié)果與免疫組化檢測(cè)的結(jié)果相一致。 2 NF-кB蛋白在食管上

7、皮不同病變中的表達(dá)采用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)45例癌組織、21例不典型增生組織、24例正常組織中NF-кB蛋白的檢測(cè)結(jié)果顯示：NF-кB蛋白在癌組織中的表達(dá)(80.0％)明顯高于不典型增生組織(57.1％)和正常組織(20.8％)，三者差別有顯著意義(P<0.05)。NF-кB蛋白的表達(dá)與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織的NF-кB蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率(96.0％)明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織(60.0％)；NF-кB蛋白

8、的表達(dá)與腫瘤浸潤(rùn)深度成正相關(guān)(P<0.05)，浸及纖維膜的癌組織的陽(yáng)性表達(dá)(93.1％)明顯高于未浸及纖維膜的癌組織(56.3％)；但NF-кB蛋白的表達(dá)與患者性別、年齡、癌組織的分化程度無(wú)關(guān)(P>0.05)。 3 IкB-α蛋白在食管上皮不同病變中的表達(dá)采用免疫組織化學(xué)技術(shù)45例癌組織、21例不典型增生組織、24例正常組織中IкB-α蛋白的檢測(cè)結(jié)果顯示：IкB-α蛋白在癌組織中的表達(dá)(80.0％)明顯高于不典型增生組織(52.

9、3％)和正常組織(8.3％)，三者差別有顯著意義(P<0.05)；IкB-α蛋白的表達(dá)與食管癌組織的淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織的IкB-α蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率(92.0％)明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織(65.0％)；IкB-α蛋白的表達(dá)與腫瘤浸潤(rùn)深度成正相關(guān)(P<0.05)；但I(xiàn)кB-α蛋白的表達(dá)與患者性別、年齡、癌組織的分化程度無(wú)關(guān)(P>0.05)。 4 MMP-9蛋白在食管上皮不同病變中的表達(dá)采用免疫

10、組織化學(xué)技術(shù)對(duì)45例癌組織、21例不典型增生組織、24例正常組織中 MMP-9蛋白的檢測(cè)結(jié)果顯示：MMP-9蛋白在癌組織中的表達(dá)(73.3％)明顯高于不典型增生組織(71.4％)和正常組織(16.7％)，三者差別有顯著意義(P<0.05)；MMP-9蛋白的表達(dá)與食管癌組織的分化程度呈負(fù)相關(guān)，分化程度越高，MMP-9蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率越低(P<0.05)；且MMP-9蛋白的表達(dá)與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移有關(guān)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織的MMP-9蛋白的陽(yáng)性表

11、達(dá)率(88.0％)明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織(55.0％)，兩者差別有顯著意義(P<0.05)；MMP-9蛋白的表達(dá)與腫瘤浸潤(rùn)深度有關(guān)，浸及纖維膜的癌組織的陽(yáng)性表達(dá)(86.2％)明顯高于未浸及纖維膜的癌組織(50.0％)，且兩者差別有顯著意義(P<0.05)；但MMP-9蛋白的表達(dá)與患者年齡、性別無(wú)關(guān)(P>0.05)。 5 OPN與NF-кB的相關(guān)性分析OPN蛋白的表達(dá)與NF-кB蛋白的表達(dá)之間成正相關(guān)(X<'2>=7.148

12、，P<0.05)。 6 OPN與IкB-α的相關(guān)性分析OPN蛋白的表達(dá)與IкB-α蛋白的表達(dá)之間成正相關(guān)(X<'2>=11.087，P<0.05)。 7 OPN與MMP-9的相關(guān)性分析OPN蛋白的表達(dá)與MMP-9蛋白的表達(dá)之間無(wú)明顯相關(guān)關(guān)系(X<'2>=0.015，P>0.05)。 8 NF-кB與IкB-α的相關(guān)性分析NF-к B蛋白的表達(dá)與IкB-α蛋白的表達(dá)之間成正相關(guān)(X<'2>=29.618，P<0.0

13、5)。 9 NF-кB與MMP-9的相關(guān)性分析NF-кB蛋白的表達(dá)與MMP-9蛋白的表達(dá)之間成正相關(guān)(X<'2>=8.295，P<0.05)。 10 IкB-α與MMP-9的相關(guān)性分析IкB-α蛋白的表達(dá)與MMP-9蛋白的表達(dá)之間無(wú)明顯相關(guān)關(guān)系(X<'2>=0.117，P>0.05)。 結(jié)論 1 OPN蛋白及OPNrnRNA在食管鱗癌組織中的表達(dá)明顯高于不典型增生組織及正常食管粘膜組織，因而提示OPN可能

14、與食管癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)：免疫組化及原位雜交均證明OPN在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的原發(fā)性食管鱗癌組織中的表達(dá)明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，提示OPN與食管癌的轉(zhuǎn)移有關(guān)；OPN蛋白及其mRNA水平的表達(dá)均與腫瘤的浸潤(rùn)深度成正相關(guān)，提示OPN與食管癌浸潤(rùn)有關(guān)。 2 在食管癌組織中OPN、NF-кB、IкB-α及MMP-9表達(dá)量均高于不典型增生組織和正常的食管粘膜組織，而且四者在食管癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及有無(wú)纖維膜浸潤(rùn)呈顯著正相關(guān)。表明在食管