開(kāi)心解郁湯治療血管性抑郁癥機(jī)理研究.pdf

1、作為抑郁癥的一種特殊亞型，血管性抑郁癥是危害嚴(yán)重的晚發(fā)性血管障礙性抑郁癥，隨著人口老齡化和心腦血管疾病發(fā)病率增加，血管性抑郁癥的發(fā)病率增加。血管性疾病與抑郁癥互相影響，明顯增加了患者的致殘率和死亡率，造成患者及其家庭、社會(huì)的嚴(yán)重負(fù)擔(dān)，且本病患者對(duì)目前抗抑郁劑治療反應(yīng)性低、耐受性差，易出現(xiàn)毒副作用。因此，血管性抑郁癥已成為關(guān)乎人口健康和社會(huì)公共衛(wèi)生的重大問(wèn)題，在國(guó)外已成為研究的熱點(diǎn)，在國(guó)內(nèi)還較少涉足這方面的研究。
　　中醫(yī)藥治療具有

2、整體調(diào)節(jié)的特點(diǎn)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究和臨床報(bào)道均表明中藥治療本病的有效性。與抗抑郁西藥相比，它可以避免長(zhǎng)期用藥的毒副作用，然而其作用機(jī)理仍不明確。因此我們利用血管性抑郁癥大鼠模型對(duì)導(dǎo)師黃世敬研究員治療本病的經(jīng)驗(yàn)方一開(kāi)心解郁湯的可能作用機(jī)制展開(kāi)實(shí)驗(yàn)研究。
　　研究目的：
　　研究血管性抑郁癥模型大鼠行為學(xué)、腦血流、海馬形態(tài)學(xué)和海馬GFAP\BDNF的表達(dá)變化及開(kāi)心解郁湯的干預(yù)作用，探討血管性抑郁癥的發(fā)病機(jī)理及開(kāi)心解郁湯的抗抑郁作用機(jī)制

3、。
　　研究方法：
　　1.動(dòng)物分組及模型復(fù)制：100只健康成年雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠，體重240-260g，隨機(jī)分為假手術(shù)組(sham)、血管性抑郁組(model，模型組)、血管性抑郁+高劑量開(kāi)心解郁湯組(high-dosage，高劑量中藥組)、血管性抑郁+低劑量開(kāi)心解郁湯組(medium-dosage，低劑量中藥組)、血管性抑郁+鹽酸氟西汀組(fluoxetine，氟西汀組)。采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性阻

4、斷法(LBCCA)結(jié)合慢性不可預(yù)見(jiàn)性溫和應(yīng)激(CUMS)聯(lián)合孤養(yǎng)的方法建立穩(wěn)定的大鼠血管性抑郁模型；
　　2.給藥方法：灌胃給藥：高劑量中藥組給予開(kāi)心解郁湯15.4g生藥/kg·d，低劑量組給予開(kāi)心解郁湯7.7g生藥/kg·d，氟西汀組給予鹽酸氟西汀2.4mg/kg·d，假手術(shù)組和模型組給同體積蒸餾水，據(jù)體重變化每周調(diào)整灌胃量，連續(xù)灌胃給藥21天；
　　3.觀察指標(biāo)
　　3.1觀察行為學(xué)：糖水偏嗜實(shí)驗(yàn)及曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)，均于實(shí)

5、驗(yàn)前、后測(cè)定；
　　3.2測(cè)定腦血流(CBF)；
　　3.3 HE染色觀察海馬形態(tài)學(xué)變化；
　　3.4免疫組化和RT-PCR技術(shù)測(cè)定大鼠腦海馬GFAP\BDNF蛋白含量及其mRNA水平的變化。
　　研究結(jié)果：
　　1.行為學(xué)：與假手術(shù)組比較，模型組大鼠糖水消耗百分率、曠場(chǎng)試驗(yàn)中穿越格子數(shù)及站立次數(shù)明顯降低(P<0.01，P<0.05)；與模型組相比，高劑量中藥組和低劑量中藥組均能顯著增加抑郁大鼠糖水消耗百分

6、率和曠場(chǎng)試驗(yàn)中站立次數(shù)(P<0.01，P<0.05)，高劑量中藥組還能顯著增加抑郁大鼠曠場(chǎng)試驗(yàn)中穿越格子數(shù)(P<0.01)；糖水消耗百分率高劑量中藥組顯著大于低劑量中藥組(P<0.01)。
　　2.腦血流：與假手術(shù)組比較，模型組大鼠額葉及頂葉腦血流值均明顯降低(P<0.01，P<0.05)；與模型組相比，治療各組均能顯著增加額葉及項(xiàng)葉腦血流值(P<0.01，P<0.05)；高劑量中藥組顯著高于低劑量中藥組(P<0.01)，與氟西汀

7、組相當(dāng)。
　　3.海馬形態(tài)學(xué)：光鏡下大鼠海馬CA3區(qū)可見(jiàn)，假手術(shù)組形態(tài)正常，表現(xiàn)為染色均勻，結(jié)構(gòu)致密，神經(jīng)元排列整齊，層次清晰，細(xì)胞質(zhì)淡紅色，胞核明顯，核仁清楚。模型組組織結(jié)構(gòu)紊亂、間質(zhì)水腫、染色淡；可見(jiàn)神經(jīng)元丟失、大小不均，可見(jiàn)核碎裂等改變；部分血管擴(kuò)張，出現(xiàn)血管周?chē)[。治療各組海馬也可見(jiàn)病理性改變，但組織結(jié)構(gòu)紊亂及間質(zhì)水腫減輕；壞死細(xì)胞明顯減少，細(xì)胞變性程度減輕。
　　4.海馬GFAP表達(dá)：假手術(shù)組大鼠海馬各區(qū)GFAP

8、廣泛表達(dá)，陽(yáng)性細(xì)胞呈星形，深染。模型組染色陽(yáng)性細(xì)胞面積和強(qiáng)度均顯著減小，細(xì)胞數(shù)目減少。治療各組陽(yáng)性細(xì)胞面積、強(qiáng)度和數(shù)目均有所恢復(fù)。與假手術(shù)組比較，模型組大鼠平均面密度和平均光密度均明顯降低(P<0.01)；與模型組相比，高劑量中藥組能夠顯著增加平均面密度和平均光密度(P<0.01)，與氟西汀組相當(dāng)，低劑量中藥組還能夠顯著增加平均面密度(P<0.05)：此外，高劑量中藥組平均光密度顯著大于低劑量中藥組(P<0.01)。
　　與假手術(shù)

9、組相比，模型組大鼠GFAP mRNA的相對(duì)表達(dá)水平顯著降低(P<0.01)；與模型組相比，高劑量中藥組和低劑量中藥組大鼠GFAP mRNA的相對(duì)表達(dá)水平顯著增加(P<0.01，P<0.05)；此外，高劑量中藥組大鼠GFAP mRNA的相對(duì)表達(dá)水平顯著大于低劑量中藥組和氟西汀組(P<0.05)。
　　5.海馬BDNF表達(dá)：假手術(shù)組大鼠海馬各區(qū)BDNF廣泛表達(dá)，陽(yáng)性細(xì)胞胞漿呈棕黃色。模型組染色陽(yáng)性細(xì)胞面積和強(qiáng)度均顯著減小，細(xì)胞數(shù)目減少

10、。治療各組陽(yáng)性細(xì)胞面積、強(qiáng)度和數(shù)目均有所恢復(fù)。與假手術(shù)組比較，模型組大鼠平均面密度和平均光密度均明顯降低(P<0.01)；與模型組相比，高劑量中藥組能夠顯著增加平均面密度和平均光密度(P<0.01)，與氟西汀組相當(dāng)；此外，高劑量中藥組平均面密度和平均光密度顯著大于低劑量中藥組(P<0.01，P<0.05)。
　　與假手術(shù)組相比，模型組大鼠BDNF mRNA的相對(duì)表達(dá)水平顯著降低(P<0.01)；與模型組相比，高劑量中藥組和低劑量中

11、藥組大鼠BDNF mRNA的相對(duì)表達(dá)水平顯著增加(P<0.01，P<0.05)；此外，高劑量中藥組大鼠BDNF mRNA的相對(duì)表達(dá)水平顯著大于低劑量中藥組(P<0.01)，與氟西汀組相當(dāng)。
　　研究結(jié)論：
　　1.LBCCA結(jié)合CUMS聯(lián)合孤養(yǎng)的復(fù)合造模方法一方面可引起大鼠抑郁樣行為學(xué)改變，表現(xiàn)為大鼠興趣感下降、自發(fā)活動(dòng)和探究性活動(dòng)減少等；另一方面可以降低腦血流供應(yīng)，誘導(dǎo)形成大鼠血管性抑郁癥模型；
　　2.開(kāi)心解郁湯可