莪術(shù)油注射液誘導(dǎo)SKOV3細(xì)胞S期脹亡及相關(guān)分子機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察莪術(shù)油注射液對體外培養(yǎng)的人上皮性卵巢癌SKOV3細(xì)胞周期變化及CDK2、IL-1β、和P38的表達(dá)，探討莪術(shù)油注射液對SKOV3細(xì)胞周期調(diào)控，并從炎癥細(xì)胞因子和MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路方面來初步探討莪術(shù)油注射液誘導(dǎo)SKOV3脹亡的作用機(jī)制。
　　方法：不同藥物濃度作用SKOV3細(xì)胞株后，采用MTT法檢測莪術(shù)油注射液對SKOV3細(xì)胞的抑制增殖作用；通過倒臵顯微鏡觀察細(xì)胞在培養(yǎng)液中的形態(tài)學(xué)變化；對細(xì)胞進(jìn)行HE染色后通過光學(xué)顯微鏡

2、觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；通過透射電鏡觀察細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)變化；運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)來檢測細(xì)胞周期的變化；通過ELISA法來測定CDK2、IL-1β、P38的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：①莪術(shù)油注射液對SKOV3細(xì)胞體外生長具有明顯的抑制作用，其抑制作用隨濃度的增加而不斷加強(qiáng)，呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系，其中48h半數(shù)抑制濃度（IC50）為67.48μg/ml；
　?、谶x擇44.5、66.7、100μg/ml濃度的莪術(shù)油作用細(xì)胞48h后倒臵顯微鏡觀察，

3、大體可見細(xì)胞密度明顯減少，胞體變長,細(xì)胞內(nèi)顆粒感增強(qiáng)，細(xì)胞界限模糊,細(xì)胞間隙逐漸增寬，細(xì)胞質(zhì)減少,胞漿減少,細(xì)胞脫落呈懸浮狀,存活細(xì)胞減少，細(xì)胞核碎裂，可見細(xì)胞碎片，隨著莪術(shù)油作用濃度的增加，上述現(xiàn)象更加明顯；
　?、圻x擇44.5、66.7、100μg/ml濃度的莪術(shù)油作用細(xì)胞48h后進(jìn)行HE染色普通光鏡觀察，主要變化為細(xì)胞腫脹，體積增大，胞漿空泡化，胞漿內(nèi)出現(xiàn)致密顆粒，胞質(zhì)空泡化，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹；細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)分散，凝集在核膜、核仁

4、周圍，有時(shí)聚集成團(tuán)塊；胞膜起泡，通透性增加，細(xì)胞膜完整性破壞、胞膜崩解，最后細(xì)胞核溶解；
　?、苓x擇44.5、66.7、100μg/ml濃度的莪術(shù)油作用細(xì)胞48h后透射電鏡觀察，發(fā)現(xiàn)卵巢癌細(xì)胞胞體腫脹，細(xì)胞膜空泡化，細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)蟲蝕狀和空泡化，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，線粒體腫脹，嵴破壞，數(shù)量減少，細(xì)胞核染色質(zhì)分散，凝集在核膜、核仁周圍，甚至核膜完整性破壞，結(jié)構(gòu)崩解，核溶解性，細(xì)胞內(nèi)容物逸出的典型脹亡細(xì)胞形態(tài)；
　　⑤經(jīng)不同濃度莪術(shù)油注

5、射液作用SKOV3細(xì)胞48h后，隨著濃度的增加，S期細(xì)胞比例逐漸增高，G2期細(xì)胞比例逐漸減少，G1期細(xì)胞的比例變化無明顯變化規(guī)律；
　?、藿?jīng)不同濃度莪術(shù)油注射液作用48h的SKOV3細(xì)胞，隨著濃度的增加，CDK2的表達(dá)量逐漸下降；
　?、呓?jīng)不同濃度莪術(shù)油注射液作用48h的SKOV3細(xì)胞IL-1β的表達(dá)量均低于空白對照組；
　?、嘟?jīng)不同濃度莪術(shù)油注射液作用48h的SKOV3細(xì)胞，P38的表達(dá)量無明顯變化。
　　結(jié)論