蜂膠中黃酮的提取及應用研究.pdf

1、本論文主要對蜂膠中黃酮的提取、測定、分離、產品的開發(fā)應用以及產品的毒性、功能性進行了研究，主要實驗結果如下： 采用超聲波法提取蜂膠中的黃酮，通過實驗得到了超聲波提取的最佳工藝條件：乙醇濃度95％、溫度35℃、固液比1：10、提取時間20min。采用超臨界CO<,2>萃取蜂膠中有效成分，以萃取率為指標，得到了蜂膠有效成分萃取的最佳條件為萃取壓力 30Mpa，萃取溫度55℃，CO<,2>流量50kg/h，萃取時間4小時，萃取率最高達

2、到37.50％。乙醇提取蜂膠中黃酮的最佳工藝為：乙醇濃度95％、固液比1：8、提取時間24小時、提取溫度25℃，采用160-200目磷酸型活性炭在60℃下攪拌1h脫鉛，采用-18℃冷凍8h后過濾除蠟，得到的蜂膠提取物鉛含量在0.4ppm以下，蜂蠟含量在0.2％以下。 采用三種分光光度比色法和 HPLC 法對乙醇提取物和超臨界CO<,2>萃取物中的黃酮進行比較測定，得到415nm比色法的結果為 5341mg/100g-8080mg

3、/100g和1990mg/100g-2316mg/100g在四種方法中測得的結果最低，不符合測定要求，360nm 比色法高于HPLC法較為合理。510nm 比色法測定的乙醇浸泡提取物中黃酮的結果最高為 41388mg/100g-45998 mg/100g，但是超臨界CO<,2>萃取物中的黃酮為 6752-7667mg/100g?？紤]到保健食品的競爭性最終確定 510nm 比色法為測定蜂膠產品黃酮含量的方法。通過對蜂膠乙醇提取物和超臨界

4、CO<,2>萃取物的GC-MS黃酮成分統(tǒng)計分析得出總共測出 11 種黃酮，蜂膠乙醇提取物中含有9種，相對含量為 39.73％，超臨界CO<,2>萃取物中6種，相對含量為 25.32％，其中4種為兩者共有。 采用較低濃度酒精溶液分離蜂膠中較強極性的黃酮類物質的小試得率為22.5％，中試得率在20％以上，該方法能夠富集部分黃酮，為開發(fā)高黃酮含量的蜂膠保健食品提供了原料。采用冷凍、結晶、過濾、溶解、重結晶的方法處理蜂膠乙醇提取物，能夠

5、分離得到較高含量的黃酮類化合物，經過紅外光譜和液相色譜定性、定量分析得出此類化合物中的柯因純度較高。公司在生產過程中常常發(fā)現蜂膠軟膠囊內容物或蜂膠液產品中有黃色的沙狀物質，通過該分離和鑒定方法，可以確定該黃色的沙狀物質的成分。 采用蜂膠分離物進行了蜂膠新產品的開發(fā)，通過實驗得到人參蜂膠液的最佳配方為7.5％蜂膠乙醇提取物，4％的人參提取物，30％PEG400，58.5％的75％的食用酒精；高含量蜂膠軟膠囊的最佳配方為：蜂膠乙醇提

6、取物 30％，PEG40050.5％，甘油 14.5％，純化水5％；油溶蜂膠軟膠囊的最佳配方為蜂膠乙醇提取物20％，大豆油61％，蜂蠟6.5％，卵磷脂2.5％，淀粉10％。并且采用此配方進行中試，對中試的三批樣品置于38℃和相對濕度75％的環(huán)境中連續(xù)觀察三個月，其功效成分和衛(wèi)生學等指標均符合穩(wěn)定要求。人參蜂膠液急性毒理試驗LD<,50>均大于20ml/kgBW，屬無毒級。三項遺傳毒性試驗的Ames試驗、小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗和小鼠