冷凍前后臍帶間充質干細胞對造血功能影響的實驗研究.pdf

1、目的：研究冷凍前后臍帶間充質干細胞（Human umbilical cord mesenchymal stromal cells hUC-MSCs）的生物學特性及其對造血干/祖細胞體外擴增的影響。
　　方法：通過組織塊培養(yǎng)法從臍帶中分離獲得 hUC-MSCs，觀察其生長形態(tài)，取傳代培養(yǎng)至第3-6代，冷凍1、3月后復蘇。分別收集冷凍前后第三代細胞：
　?、派L動力學特點；
　?、屏魇綑z測免疫表型；
　　⑶定向分化誘

2、導成骨、成脂肪細胞；
　?、妊芯科鋵υ煅?祖細胞體外擴增的支持作用。
　　A組：單純骨髓單個核細胞（Bone marrow nuclear cells BMNCs）；
　　B組：BMNCs加人包皮成纖維細胞；
　　C組：BMNCs加骨髓間充質干細胞；
　　D組： BMNCs加冷凍前；
　　E組：BMNCs冷凍加后hUC-MSCs。
　　分別于第0d，14d，28d，35d甲基纖維素法分析造血干

3、/祖細胞集落的增殖狀態(tài)及細胞因子SDF-1、SCF、TPO、IL-6,11的含量變化。
　　結果：
　?、爬鋬銮?、后P3和P6收獲細胞的拒染率分別>93.8％和>92.4%；臍帶間質原代培養(yǎng)收獲的細胞數(shù)不同，其生長生長動力學特點差別較大；
　?、迫四殠чg質細胞具有間充質細胞部分特征；不同的是CD34為24.2%；內皮標記CD31為13.3%；
　?、抢鋬銮昂缶上虺芍?、成骨細胞分化；
　　⑷不同時間點造血干