血清游離輕鏈在多發(fā)性骨髓瘤中的臨床應(yīng)用.pdf

1、[背景和目的]
　　多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是起源于生發(fā)中心B細(xì)胞的漿細(xì)胞異常增生的惡性腫瘤，常由一種稱為不明意義丙種球蛋白增多血癥(monoclonalgammopathy of undetermined significance，MGUS)的疾病發(fā)展而來(lái)。MM臨床診斷的實(shí)驗(yàn)室檢查方法主要有血清蛋白電泳(serum protein electrophoresis，SPE)、免疫固定電泳(immuno

2、fixation electrophoresis, IFE)、毛細(xì)管區(qū)帶電泳(capillaryzoneelectrophoresis，CZE)、尿本周氏蛋白測(cè)定、血清免疫球蛋白定量、血清和尿液輕鏈的測(cè)定等，但由于靈敏度和特異性等方面的原因，部分MM患者可能漏診。近年來(lái)很多臨床研究顯示血清游離輕鏈(serum free light chain，sFLC)在MM患者臨床診斷、療效判定和病情監(jiān)測(cè)等方面均具有較高的應(yīng)用價(jià)值。國(guó)際骨髓瘤協(xié)作組2

3、006年最新的MM療效評(píng)價(jià)系統(tǒng)中已將sFLC指標(biāo)作為MM尤其是寡分泌型和不分泌型MM患者診斷及療效評(píng)估的重要標(biāo)準(zhǔn)。本研究利用全自動(dòng)免疫分析儀，采用散射比濁法測(cè)定本地區(qū)健康人群和MM患者血清中κ-FLC和λ-FLC水平，并計(jì)算血清κ-FLC/λ-FLC比值，確定本地區(qū)人群正常參考范圍，探討血清FLC在MM患者臨床診斷和治療療效評(píng)價(jià)中的意義，為MM患者的臨床診治提供依據(jù)。
　　[對(duì)象和方法]
　　1.研究對(duì)象
　　篩選20

4、12年5月-2013年5月在浙江大學(xué)附屬第一醫(yī)院血液科就診并明確診斷為MM的患者111例作為MM疾病組，30例其他血液系統(tǒng)疾病患者（排除原發(fā)性AL型淀粉樣變性、漿細(xì)胞瘤、單克隆γ球蛋白增多癥）、40例腎功能不全患者（排除MM引起的腎功能不全）和36例其它良惡性疾病患者作為其他疾病組，同時(shí)選取在我院進(jìn)行健康體檢人群（肝功能、腎功能、血常規(guī)和尿常規(guī)檢查無(wú)異常）200例作為正常對(duì)照組，結(jié)合臨床資料將研究對(duì)象分為A、B、C、D、E五組，具體分組

5、情況如下:
　　A組，MM患者，111例，其中男性68例，女性43例，男女比例1.58∶1，年齡39-82歲，平均年齡59.6±10.6歲。其中IgA型28例，IgG型68例，IgM型1例，IgD型1例，輕鏈型13例;κ型58例，λ型53例，見(jiàn)表2.2。所有患者均符合MM診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，排除原發(fā)性AL型淀粉樣變性、漿細(xì)胞瘤、單克隆γ球蛋白增多癥等其它疾病，無(wú)合并的其它腫瘤存在。111例MM患者中，22例為初次診斷患者。111例MM

6、患者中，對(duì)其中79例MM患者進(jìn)行隨訪。
　　B組，其它血液系統(tǒng)疾病患者，30例，其中男性14例，女性16例，年齡15-84歲，平均年齡53.3±17.0歲。包括淋巴瘤、急性髓系白血病、慢性粒細(xì)胞白血病和缺鐵性貧血等疾?。ㄅ懦l(fā)性AL型淀粉樣變性、漿細(xì)胞瘤、單克隆γ球蛋白增多癥等其它疾病）患者。
　　C組，腎功能不全患者，40例，其中男性22例，女性18例，年齡20-81歲，平均年齡54.8±15.9歲。所有患者均排除MM引

7、起的腎功能不全。
　　D組，其它良惡性疾病患者，共36例，其中男性20例，女性16例，年齡22-81歲，平均年齡58.5±15.7歲。
　　E組，正常對(duì)照組，200例，年齡21-79歲，平均年齡42.7±13.6歲。其中男性104例，女性96例。所有入選者肝功能、腎功能、血常規(guī)和尿常規(guī)檢查均無(wú)異常。
　　2.實(shí)驗(yàn)方法
　　(1) MM患者血清標(biāo)本的采集與保存
　　采集所有入選MM患者（包括隨訪患者）化療前空

8、腹靜脈血5ml，分置于3個(gè)促凝管，靜置2小時(shí)后，3000rpm離心10分鐘，取上層血清分裝于EP管中，置于-78℃保存。
　　(2) MM患者尿液標(biāo)本的采集與保存
　　取所有入選MM患者（包括隨訪患者）化療前晨尿2ml，3000rpm離心10分鐘，取上清液分裝于EP管中，置于-78℃保存。
　　(3)其它血液系統(tǒng)疾病患者、腎功能不全患者、其它良惡性疾病患者和正常對(duì)照組標(biāo)本的采集與保存
　　采集所有入選者空腹靜脈血

9、3ml，靜置2小時(shí)后，3000rpm離心10分鐘，取上層血清分裝于EP管中，置于-78℃保存。
　　(4)血清FLC的檢測(cè)
　　利用BNII全自動(dòng)免疫比濁儀采用定時(shí)散射比濁法的原理測(cè)定血清FLC。
　　(5)血清免疫球蛋白A、G、M(IgA、IgG、IgM)的檢測(cè)
　　利用BNII全自動(dòng)免疫比濁儀采用定時(shí)散射比濁法的原理測(cè)定血清免疫球蛋白A、G、M。
　　(6)血清輕鏈（kappa和Lambda輕鏈）和尿輕

10、鏈（尿kappa和Lambda輕鏈）的檢測(cè)
　　利用IMMAGE800全自動(dòng)免疫分析儀采用速率散射比濁法的原理對(duì)血清輕鏈（kappa和Lambda輕鏈）和尿輕鏈（尿kappa和Lambda輕鏈）進(jìn)行檢測(cè)。
　　(7) SPE的檢測(cè)
　　利用全自動(dòng)瓊脂糖凝膠電泳分析儀，采用醋酸纖維素薄膜作為電泳的支持介質(zhì)進(jìn)行SPE的檢測(cè)。
　　(8)血清IFE的檢測(cè)
　　利用Spife3000全自動(dòng)瓊脂糖凝膠電泳分析儀進(jìn)行血

11、清IFE的檢測(cè)。
　　(9)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件中的相關(guān)方法。
　　[結(jié)果]
　　1.200例健康人群血清κ-FLC介于5.60～31.75mg/L之間，血清λ-FLC介于5.42～49.38mg/L之間，血清κ-FLC/λ-FLC比值介于0.34～1.75之間，95％可信區(qū)間分別為:血清κ-FLC，6.08～25.40mg/L;血清λ-FLC，7.66～32.70mg/L;血清κ-FLC/λ-

12、FLC比值，0.32～1.24。
　　2.200例健康人群中，不同性別、不同年齡人群血清FLC水平無(wú)顯著差異。
　　3.111例MM患者血清κ-FLC、血清λ-FLC和血清κ-FLC/λ-FLC比值分別為:157.12.19±370.10，256.69±991.39，15.05±39.60。MM患者組血清κ-FLC、血清λ-FLC和血清κ-FLC/λ-FLC比值水平與其他血液疾病患者組、腎功能不全患者組、其它良惡性疾病患者組

13、和正常對(duì)照組之間均有顯著差異，而其他4組之間均無(wú)顯著差異。
　　4.22例初診MM患者中，所有患者血清FLC水平均異常，21例患者IFE結(jié)果陽(yáng)性，20例患者SPE結(jié)果陽(yáng)性，20例患者血清輕鏈（Kappa和Lambda輕鏈）異常，18例患者尿輕鏈（kappa和Lambda輕鏈）異常。
　　5.79例隨訪MM患者中，4例療效評(píng)價(jià)為完全緩解(CR)，28例療效評(píng)價(jià)為部分緩解(PR)，11例療效評(píng)價(jià)為疾病進(jìn)展(PD)，35例療效評(píng)價(jià)