水蛭素盆腔灌注對大鼠輸卵管炎性阻塞性不孕模型病理及BCL-2、EGFR蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　通過實驗觀察水蛭素經(jīng)盆腔內(nèi)灌注對輸卵管炎性阻塞性不孕大鼠模型輸卵管病理改變及BcL-2、EGFR表達(dá)的影響，探討其作用機(jī)制，為治療輸卵管炎性阻塞性不孕提供新的思路及理論依據(jù)。
　　方法:
　　采用潔凈型健康未孕SD雌性大鼠100只，隨機(jī)分為正常對照組20只、剩余80只用混合細(xì)菌接種法注入大鼠輸卵管復(fù)制炎性阻塞性模型。造模20天后，將剩余的65只（因造模過程中死亡11只和解剖4只）隨機(jī)分為三組，即模型組21只

2、、杏香兔耳風(fēng)組22只、水蛭素組22只。在同等條件下飼養(yǎng)，造模第20天開始盆腔灌注給藥，正常對照組和模型組盆腔灌注適量生理鹽水。每組又分為兩個時間組（15天、30天）。分別在灌注給藥后第15天和第30天隨機(jī)處死各組大鼠（6-9只）取材，肉眼觀察用藥前后及不同組別輸卵管的大體形態(tài)變化，HE染色觀察輸卵管組織形態(tài)學(xué)變化，免疫組化檢測輸卵管上皮細(xì)胞BcL-2、EGFR的表達(dá)。剩余大鼠各組4-5只停止給藥觀察受孕情況。
　　結(jié)果：
　

3、　1．混合細(xì)菌接種法注入輸卵管復(fù)制炎性阻塞性模型，于造模第5、10、15、20天隨機(jī)抽取大鼠輸卵管組織，肉眼及HE染色觀察確認(rèn)造模20天模型復(fù)制成功。
　　2.經(jīng)盆腔灌注治療后觀察大鼠輸卵管情況，與模型組比較，水蛭素組和杏香兔耳風(fēng)組能不同程度對模型大鼠輸卵管組織形態(tài)學(xué)進(jìn)行改善。
　　3．大鼠輸卵管上皮細(xì)胞漿內(nèi)BcL-2的表達(dá)：BcL-2在正常組大鼠輸卵管上皮細(xì)胞中不表達(dá)，在模型組中表達(dá)明顯，兩組比較差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意（P<0

4、.01）；與模型組比較，杏香兔耳風(fēng)組和水蛭素組均能不同程度的抑制模型大鼠輸卵管上皮細(xì)胞BcL-2的表達(dá)（P<0.05）。
　　4．大鼠輸卵管上皮細(xì)胞膜上EGFR的表達(dá)：EGFR在正常組大鼠輸卵管上皮細(xì)胞中呈少量陽性表達(dá)，在模型組中表達(dá)明顯增強(qiáng)，兩組比較差異有顯著性（P<0.01）；與模型組比較，杏香兔耳風(fēng)組和水蛭素組均能不同程度的抑制模型大鼠輸卵管上皮細(xì)胞EGFR的表達(dá)（P<0.05）。
　　5．治療15天與30天后比較：①

5、BcL-2各組兩時間段之間進(jìn)行兩兩比較，正常組、模型組差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），水蛭素組和杏香兔耳風(fēng)組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；②EGFR各組兩時間段進(jìn)行兩兩比較，正常組、模型組、差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；水蛭素組和杏香兔耳風(fēng)組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　6．觀察盆腔灌注治療30天后大鼠受孕情況，模型組受孕率為20％，比正常組顯著下降，治療后各組受孕率均有所提高，水蛭素組與杏香兔耳風(fēng)組比較無

6、統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1．混合菌接種法可成功制作大鼠輸卵管炎性阻塞模型。
　　2.水蛭素經(jīng)盆腔灌注后能明顯減輕大鼠輸卵管炎癥，提高受孕率；給藥30天效果好于給藥15天。
　　3.水蛭素經(jīng)盆腔灌注給藥后能抑制模型大鼠輸卵管上皮細(xì)胞BcL-2蛋白和EGFR蛋白的表達(dá)，促進(jìn)炎癥細(xì)胞及其他增生細(xì)胞凋亡，調(diào)節(jié)細(xì)胞生長，促進(jìn)受損組織修復(fù)，從而發(fā)揮抗炎作用，這可能是治療輸卵管炎性阻塞性不孕的作用機(jī)制之一