綿羊grb7基因的表達(dá)及對(duì)胚胎附植的影響.pdf

1、本試驗(yàn)以中國(guó)美利奴細(xì)毛羊（軍墾型）40只為研究對(duì)象，利用同期發(fā)情處理、半定量RT-PCR、熒光定量 RT-PCR、HE染色和免疫組織化學(xué)等方法，探究綿羊 grb7基因的表達(dá)及對(duì)胚胎附植的影響。試驗(yàn)結(jié)果如下：
　　繁殖季節(jié)里利用孕酮海綿栓與 PMSG結(jié)合的方法探究石河子地區(qū)綿羊同期發(fā)情，可以使總發(fā)情率達(dá)到85％以上。具體操作：任意選取同一天放置孕酮海綿栓，12天后撤栓并注射 PMSG330 IU，自撤栓后第24 h開始至第72 h截

2、止，每間隔12 h試情一次，觀察母羊發(fā)情情況，記錄發(fā)情數(shù)，統(tǒng)計(jì)分析撤栓后24 h-72 h的發(fā)情率。
　　通過(guò)組織表達(dá)譜檢測(cè)，結(jié)果表明，grb7在21 d懷孕母羊的心臟、皺胃、大腸、小腸、瘤胃、下丘腦、大腦、小腦等組織均未檢測(cè)出表達(dá)，在輸卵管、腎臟、子宮體、卵巢、垂體、脾臟及膀胱等組織出現(xiàn)特異性表達(dá)，其中在輸卵管、子宮體、卵巢和垂體等與生殖密切相關(guān)的組織相對(duì)表達(dá)量較高，提示 grb7可能在母羊妊娠過(guò)程中發(fā)揮重要作用。
　　實(shí)

3、時(shí)熒光定量 PCR結(jié)果顯示，從綿羊妊娠第9d至25d階段，grb7在母羊子宮內(nèi)膜組織的表達(dá)量呈逐漸上升趨勢(shì)，孕羊 grb7的表達(dá)量均顯著高于同一時(shí)間點(diǎn)同期發(fā)情的未孕母羊。grb7在胚胎附植期綿羊子宮內(nèi)膜中的 mRNA表達(dá)呈動(dòng)態(tài)時(shí)空變化，提示 grb7可能在綿羊早期胚胎附植中發(fā)揮著重要的作用。
　　HE染色和免疫組織化學(xué)研究表明，胚胎附植期綿羊子宮內(nèi)膜中GRB7蛋白主要定位于子宮內(nèi)膜上皮，且呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)時(shí)空變化。本試驗(yàn)結(jié)果表明grb7基