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文檔簡介
1、以昆明小鼠體內(nèi)受精胚胎、體外受精胚和孤雌發(fā)育胚為試驗材料,探討Ghrelin、SCF對昆明小鼠體內(nèi)受精胚胎、體外受精胚和孤雌發(fā)育胚體外發(fā)育的影響,旨在尋找一種能有效影響昆明小鼠早期胚胎體外發(fā)育的因子,優(yōu)化小鼠胚胎體外培養(yǎng)體系,為其它哺乳動物胚胎的體外培養(yǎng)提供參考和借鑒。
實驗包括以下部分,研究結(jié)果如下:
1.添加Ghrelin對小鼠早期胚胎體外發(fā)育的影響:
(1)與對照組相比,在HTF培養(yǎng)液中添
2、加不同濃度的Ghrelin對小鼠體內(nèi)受精胚的卵裂率無顯著影響(P>0.05);與對照組相比,培養(yǎng)液中添加0.1 ng/mlGhrelin顯著降低了桑椹胚及囊胚發(fā)育率(P<0.05),但進一步提高Ghrelin濃度,小鼠體內(nèi)受精胚的桑椹胚及囊胚發(fā)育率明顯回升了,盡管與0.1mg/ml組差異不顯著(P>0.05);各培養(yǎng)組之間囊胚細胞總數(shù)無顯著差異(P>0.05);
(2)與對照組相比,在HTF培養(yǎng)液中添加不同濃度(0.1 n
3、g/ml-100ng/ml,下同)的Ghrelin對小鼠IVF胚胎的卵裂率、桑椹胚率、囊胚細胞總數(shù)均沒有顯著影響(P>0.05),但添加1ng/ml的Ghrelin顯著降低了小鼠IVF胚的囊胚發(fā)育率(P<0.05);
(3)與對照組相比,在HTF培養(yǎng)液中添加0.1ng/ml Ghrelin使小鼠孤雌發(fā)育胚在囊胚發(fā)育率上明顯低于對照組,但差異不顯著(P>0.05),進一步提高Ghrelin添加量(1ng/ml和10 ng/m
4、l),則囊胚發(fā)育率又顯著回升(P<0.05);添加不同濃度的Ghrelin對孤雌發(fā)育胚的卵裂率及桑椹胚率無顯著影響(P<0.05)。
2.添加SCF對小鼠早期胚胎體外發(fā)育的影響:
(1)與對照組相比,在KSOM培養(yǎng)液中添加不同濃度(50 ng/ml和100 ng/ml,下同)的SCF對小鼠自然受精胚在卵裂率、桑椹胚率、囊胚發(fā)育率及囊胚細胞總數(shù)等方面均沒有顯著影響(P>0.05);
(2)與對照組
5、相比,在KSOM培養(yǎng)液中添加不同濃度的SCF對小鼠IVF胚胎的卵裂率、囊胚總細胞數(shù)都沒有顯著影響(P>0.05),但添加組100ng/ml顯著提高了桑椹胚率、囊胚發(fā)育率(P<0.05);
(3)與對照組相比,在KSOM培養(yǎng)液中添加不同濃度的SCF對小鼠孤雌發(fā)育胚胎的卵裂率、桑椹胚率均沒有顯著影響(P>0.05),囊胚率和囊胚細胞總數(shù)雖然有所提高,但是差異不顯著(P>0.05)。
綜上所述,Ghrelin對小鼠
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