抗氧化劑對(duì)小鼠1-細(xì)胞期胚胎體外發(fā)育的影響.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟冢簷z測(cè)三種抗氧化劑——氮-乙酰半胱氨酸(N-Acetylcysteine，NAC)、維生素C(VitaminC,VC)和維生素B5(VitaminB5,VB5)單獨(dú)及組合處理對(duì)小鼠1-細(xì)胞期胚胎體外發(fā)育的影響，測(cè)定其克服小鼠胚胎體外發(fā)育阻滯、促進(jìn)發(fā)育的最佳濃度或比例，探討其作用機(jī)制，為建立高效胚胎體外生產(chǎn)體系，提高生產(chǎn)效率提供可靠的依據(jù)。 實(shí)驗(yàn)以M16培養(yǎng)液為基礎(chǔ)液，在其中分別添加不同濃度的抗氧化劑或組合，檢測(cè)它們

2、對(duì)小鼠1-細(xì)胞期胚胎體外發(fā)育的影響，并確定其克服小鼠胚胎體外發(fā)育阻滯、促進(jìn)胚胎發(fā)育的最佳濃度或比例。主要包括五個(gè)實(shí)驗(yàn)： (一)、確定NAC克服小鼠胚胎體外發(fā)育阻滯、促進(jìn)胚胎發(fā)育的最佳濃度。 (二)、確定VC克服小鼠胚胎體外發(fā)育阻滯、促進(jìn)胚胎發(fā)育的最佳濃度。 (三)、確定VB5克服小鼠胚胎體外發(fā)育阻滯、促進(jìn)胚胎發(fā)育的最佳濃度。 (四)、確定三種抗氧化劑組合克服小鼠胚胎體外發(fā)育阻滯、促進(jìn)胚胎發(fā)育的最佳比例。

3、 (五)、三種抗氧化劑單獨(dú)及組合處理抗氧化效果的比較實(shí)驗(yàn)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：(一)、NAC對(duì)胚胎體外發(fā)育的影響。結(jié)果顯示，NAC濃度在0.5～2mM/L之間時(shí)均能顯著提高囊胚發(fā)育率(P＜0.05)，濃度為1mM/L時(shí)囊胚發(fā)育率最高(52.08％)，抗氧化效果最佳。 (二)、VC對(duì)胚胎體外發(fā)育的影響。結(jié)果顯示，VC濃度在40～50μM/L之間時(shí)能顯著提高囊胚發(fā)育率(P＜0.05)，濃度為50μM/L時(shí)囊胚發(fā)育率最高(49.

4、44％)，抗氧化效果最佳。 (三)、VB5對(duì)胚胎體外發(fā)育的影響。結(jié)果顯示，5μM/L組囊胚發(fā)育率最高(48.50％)，顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，抗氧化效果最佳。 (四)、按不同比例組合的三種抗氧化劑對(duì)胚胎體外發(fā)育的影響。結(jié)果顯示，將三種抗氧化劑均按各自最佳濃度的30～100％的比例同時(shí)加入M16液中培養(yǎng)胚胎，均能顯著提高囊胚發(fā)育率(P＜0.05)；其中按50％比例組合時(shí)囊胚發(fā)育率最高(82.69％)，且當(dāng)組合比例從

5、50％開(kāi)始增加或減少，囊胚發(fā)育率均呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，所以最佳比例為50％。 (五)、三種抗氧化劑單獨(dú)及組合處理抗氧化效果的比較實(shí)驗(yàn)。結(jié)果再次證實(shí)，三種抗氧化劑單獨(dú)處理的最佳濃度及50％組合處理均能顯著促進(jìn)胚胎發(fā)育(P＜0.05)，50％組合處理能大大提高囊胚發(fā)育率(83.54％)，50％組合處理抗氧化效果與NAC組相似，且兩組囊胚發(fā)育率均顯著高于VC和VB5組(P＜0.05)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)論：在M16液中添加以上任何一種抗氧化劑