丙烯酰胺致小鼠細(xì)胞DNA損傷及抗氧化劑的保護(hù)作用研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康? 應(yīng)用彗星試驗(yàn)檢測(cè)丙烯酰胺(AA)染毒后小鼠多個(gè)臟器細(xì)胞DNA的損傷及損傷后的修復(fù)情況，以進(jìn)一步研究AA遺傳毒性，探討AA體內(nèi)遺傳毒性可能的靶器官，比較不同細(xì)胞對(duì)AA的敏感性。并在一定劑量的維生素C和番茄紅素干預(yù)時(shí)，檢測(cè)二者對(duì)AA引起的小鼠淋巴細(xì)胞及肝細(xì)胞DNA損傷情況的影響，測(cè)定血漿及肝組織中脂質(zhì)過氧化物含量及抗氧化酶活性的改變情況，以揭示從遺傳毒性與氧化損傷之間的聯(lián)系，為從遺傳毒性機(jī)制及其預(yù)防提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

2、 實(shí)驗(yàn)方法: 1.在研究從作用的時(shí)效關(guān)系時(shí)，以50mg/kg的從給小鼠一次性腹腔注射，應(yīng)用彗星試驗(yàn)檢測(cè)從染毒0、3、6、12、24h后小鼠外周血淋巴細(xì)胞、骨髓、肝、肺、脾、腎及睪丸細(xì)胞的DNA損傷情況。量效關(guān)系研究中，分別以0、10、25、50mg/kg的從腹腔注射，檢測(cè)12h后不同細(xì)胞DNA的損傷。 2.為了研究抗氧化劑對(duì)從毒性的影響，分別以50mg/kg的維生素C或10mg/kg劑量的番茄紅素連續(xù)灌胃小鼠10天，

3、并從第6天開始腹腔注射從，給藥結(jié)束后測(cè)定小鼠淋巴細(xì)胞、肝細(xì)胞DNA損傷及血漿和肝組織中MDA含量、SOD酶活力的變化。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果: 1.以50mg/kg的從給小鼠腹腔注射，肝細(xì)胞在染毒后3小時(shí)，骨髓和淋巴細(xì)胞在6小時(shí)，彗星尾長(zhǎng)、尾部DNA％及尾矩開始增加(P<0.05)，到12小時(shí)達(dá)到最大值(P<0.01)，24h時(shí)有所下降，但未恢復(fù)到對(duì)照組水平(P<0.05)；睪丸細(xì)胞在12h時(shí)損傷程度與對(duì)照組比較有顯著性差異(

4、P<0.01)；脾細(xì)胞在3h時(shí)出現(xiàn)DNA損傷，至24h時(shí)又基本恢復(fù)到對(duì)照組水平;各時(shí)間點(diǎn)未發(fā)現(xiàn)肺和腎臟細(xì)胞的明顯損傷(P>0.05)。 2.骨髓細(xì)胞在低劑量(10mg/kg)時(shí)，彗星各指標(biāo)即對(duì)照組相開始增加(P<0.05)，淋巴細(xì)胞、肝及睪丸細(xì)胞在中劑量(25mg/kg)時(shí)，彗星指標(biāo)較對(duì)照組有明顯增加(P<0.05)，并隨從劑量的加大而增大。脾細(xì)胞只在從高劑量(50mg/kg)時(shí)彗星指標(biāo)才較對(duì)照組有明顯增加(P<0.05)3

5、.從染毒5天后，除出現(xiàn)淋巴細(xì)胞和肝細(xì)胞的DNA損傷外，小鼠血漿及肝組織中MDA含量升高，SOD活力下降，與陰性對(duì)照組相比差別有顯著性(P<0.05)。與AA組相比，給予維生素C或番茄紅素的小鼠，其兩種細(xì)胞彗星尾長(zhǎng)、尾部DNA％及尾矩，都有顯著下降(P<0.05)，但仍高于陰性對(duì)照組(P<0.05)，血漿及肝組織中MDA含量均有明顯下降，SOD活力顯著升高(P<0.05)。 結(jié)論: 1.50mg/kg劑量的AA能引起

6、小鼠淋巴細(xì)胞、骨髓、肝、脾及睪丸等細(xì)胞的DNA損傷，機(jī)體對(duì)這種損傷具有一定的修復(fù)能力； 2.不同細(xì)胞對(duì)從的敏感性及DNA損傷修復(fù)能力不同； 3.AA染毒后外周血淋巴細(xì)胞在彗星試驗(yàn)中的拖尾現(xiàn)象可反映體內(nèi)組織器官DNA損傷的一般情況，可將其作為監(jiān)測(cè)機(jī)體接觸從后組織細(xì)胞DNA損傷作用的生物標(biāo)志。 4.AA引起的小鼠細(xì)胞DNA損傷與脂質(zhì)過氧化作用有關(guān)； 5.維生素C和番茄紅素對(duì)AA染毒小鼠的脂質(zhì)過