綿羊卵母細(xì)胞及體外早期胚胎中nNOS、eNOS、iNOS的表達(dá).pdf

1、一氧化氮(Nitric oxide，NO)作為一種具有自由基性質(zhì)的多功能活性分子，在體內(nèi)多種信號(hào)傳遞中起重要作用。體內(nèi)的NO主要由一氧化氮合酶(NOS)催化產(chǎn)生，現(xiàn)已確認(rèn)的NOS包含三種亞型:神經(jīng)型(nNOS)、誘導(dǎo)型(iNOS)、內(nèi)皮型(eNOS)。由于NO的半衰期非常短而且極不穩(wěn)定，而NOS是NO產(chǎn)生的限速酶，因此NOS的表達(dá)量可以線(xiàn)性反映出NO的生成量。隨著對(duì)NO的廣泛研究，發(fā)現(xiàn)其與生殖存在著必不可少的某些聯(lián)系，特別在動(dòng)物個(gè)體發(fā)育

2、的早期。為了了解一氧化氮合酶(NOS)的三個(gè)亞型在綿羊卵母細(xì)胞體外成熟及早期胚胎中的表達(dá)情況，本實(shí)驗(yàn)，運(yùn)用體外培養(yǎng)體系獲得未成熟卵母細(xì)胞、成熟卵母細(xì)胞及不同發(fā)育時(shí)期的早期胚胎（2-細(xì)胞、4-細(xì)胞、8-細(xì)胞、桑葚胚、囊胚），應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)目標(biāo)基因nNOS、eNOS、iNOS相對(duì)表達(dá)情況。結(jié)果顯示:
　　1.在綿羊未成熟卵母細(xì)胞、成熟卵母細(xì)胞和早期胚胎發(fā)育各階段，nNOS、eNOS、iNOS mRNA均有表達(dá)。

3、　　2.綿羊卵母細(xì)胞成熟過(guò)程中，nNOS mRNA相對(duì)表達(dá)量在未成熟卵母細(xì)胞期及成熟卵母細(xì)胞期均顯著高于eNOS、iNOS的表達(dá)量(p＜0.05)，并且在成熟卵母細(xì)胞中的表達(dá)顯著高于未成熟卵母細(xì)胞(p＜0.05)。
　　3.早期胚胎發(fā)育過(guò)程中，nNOS、iNOS mRNA相對(duì)表達(dá)水平顯著高于eNOS的表達(dá)(p＜0.05)，并且表達(dá)趨勢(shì)相似，具體呈現(xiàn)出4-細(xì)胞期較2-細(xì)胞有降低趨勢(shì);8-細(xì)胞期的表達(dá)量顯著升高(p＜0.05)并在桑葚