小鼠吸煙早期戒煙后肺泡巨噬細(xì)胞的肺內(nèi)表達(dá)水平的研究.pdf

1、目的：
　　 本實驗應(yīng)用被動吸煙小鼠模型,探討小鼠吸煙早期戒煙后肺泡巨噬細(xì)胞表達(dá)水平的變化。
　　 實驗材料及方法：
　　 一、實驗動物和分組
　　 選取8周齡健康雌性C57BL/6J小鼠(SPF級),30只,體重20g左右,由中國醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供,常規(guī)飼料自由飲水,溫度22±1℃,濕度50％左右,明/暗周期為12h。實驗小鼠隨機分成對照組(N)5只,吸煙組(S)15只,戒煙組(SC)10只。吸煙

2、組于吸煙4周、5周、8周后取材,戒煙組分別于吸煙4周后戒煙1周、4周后取材,對照組于4周取材。
　　 二、被動吸煙模型
　　 將吸煙組及戒煙組小鼠每天放入自制的煙熏艙(100cm×50cm×50cm),每次暴露于10支紅金龍牌香煙,1h/d,2次/天,間隔時間大于6小時,5天/周。戒煙組于熏煙滿4周后,脫離煙草環(huán)境,戒煙1周及4周后取材。
　　 三、主要實驗方法
　　 (一)肺組織病理:HE染色。

3、　　 (二)肺組織免疫組化染色觀察肺泡巨噬細(xì)胞的肺內(nèi)表達(dá)水平。
　　 (三)應(yīng)用IPP6.0軟件測量免疫組化圖片的平均光密度。
　　 四、統(tǒng)計學(xué)分析
　　 應(yīng)用SPSS16.0軟件進(jìn)行分析,實驗數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s),樣本組間比較方差齊采用LSD及SNK檢驗,方差不齊時采用非參數(shù)檢驗,P值＜0.05認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1、肺組織病理發(fā)現(xiàn)吸煙組小鼠氣道粘膜下炎性細(xì)胞浸

4、潤較正常同齡鼠明顯增加,隨著吸煙時間的延長,氣道炎癥反應(yīng)逐漸加重,但是戒煙1周和4周后氣道粘膜下和血管周圍炎性細(xì)胞均未回復(fù)至正常水平。
　　 2、與對照組相比,吸煙組肺泡巨噬細(xì)胞表達(dá)水平明顯升高(P＜0.05),并隨著吸煙時間的延長,逐漸增加;雖然戒煙組肺泡巨噬細(xì)胞的表達(dá)水平不及繼續(xù)吸煙組,但均未恢復(fù)至戒煙前水平,甚至在戒煙4周時觀察到更多的肺泡巨噬細(xì)胞的浸潤。
　　 結(jié)論：
　　 吸煙早期戒煙后肺內(nèi)存在著持續(xù)甚