亞硝酸鹽對(duì)粗蛋白質(zhì)測(cè)定的影響及其測(cè)定方法的改進(jìn)研究.pdf

1、本試驗(yàn)將從鹽酸溶液濃度的標(biāo)定方法、蒸餾儀器的選擇、飼料中亞硝酸鹽含量等方面對(duì)飼料中粗蛋白質(zhì)含量測(cè)定時(shí)產(chǎn)生的影響以及飼料中亞硝酸鹽含量測(cè)定方法的比較及改進(jìn)進(jìn)行研究。
　　凱氏定氮法是食品和飼料中測(cè)定粗蛋白質(zhì)應(yīng)用最廣泛也是最經(jīng)典的方法，其中鹽酸溶液濃度的標(biāo)定是凱氏定氮法中至關(guān)重要的一步，鹽酸溶液濃度的標(biāo)定方法分為無(wú)水碳酸鈉法和硼砂法。無(wú)水碳酸鈉標(biāo)定法需要在270℃～300℃干燥至恒重，操作較費(fèi)時(shí)費(fèi)事，且指示劑顏色不易把握;而硼砂標(biāo)定法

2、中只說(shuō)是干燥的硼砂，并未說(shuō)明干燥程度以及如何干燥。蒸餾裝置是凱氏定氮法中的重要儀器，分為半微量蒸餾裝置和全自動(dòng)凱氏定氮儀等類型，不同蒸餾裝置對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響尚無(wú)報(bào)道。試驗(yàn)表明:無(wú)水碳酸鈉須在270℃～300℃干燥至恒重才可標(biāo)定鹽酸。380℃干燥至恒重的硼砂在標(biāo)定鹽酸時(shí)計(jì)算式中的硼砂分子式要按無(wú)水硼砂計(jì)算;100℃干燥的硼砂不可以用于鹽酸標(biāo)定;正常室溫密閉存放的硼砂更適于北方地區(qū)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行鹽酸標(biāo)定（因?yàn)槟戏綕穸容^大）。全自動(dòng)凱氏定氮儀較半

3、微量蒸餾裝置測(cè)定準(zhǔn)確性更好。
　　亞硝酸鈉存在于飼料原料及配合飼料中，尤其在魚(yú)粉、肉骨粉及青綠飼料中含量較大，目前沒(méi)有試驗(yàn)研究表明飼料中亞硝酸鹽對(duì)其粗蛋白質(zhì)含量測(cè)定是否產(chǎn)生影響，但是通過(guò)人為向標(biāo)準(zhǔn)樣品硫酸銨中加入一定濃度梯度的亞硝酸鈉后，發(fā)現(xiàn)測(cè)出的硫酸銨中的氮含量減少，損失的氮含量與亞硝酸鈉的添加量呈現(xiàn)一定的線性關(guān)系。向牛血清白蛋白和飼料中加入亞硝酸鈉后會(huì)出現(xiàn)同樣的線性關(guān)系。試驗(yàn)表明:亞硝酸鹽的存在會(huì)對(duì)凱氏定氮法測(cè)定粗蛋白質(zhì)時(shí)產(chǎn)生

4、一定的副作用，會(huì)與部分含氮化合物反應(yīng)，降低蛋白含量的真實(shí)值，嚴(yán)重影響粗蛋白質(zhì)測(cè)定的準(zhǔn)確性。
　　草酸是最簡(jiǎn)單的有機(jī)二元酸之一，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)式HOOCCOOH。NO2-中的N為+3價(jià)，所以既有氧化性，又有還原性，在酸性介質(zhì)中呈現(xiàn)較強(qiáng)的氧化能力。與很弱的草酸、乙酸均可反應(yīng)?？赡艿姆磻?yīng)為:2NO2-+2H+=NO+NO2↑+H2O。向加有不同濃度梯度亞硝酸鈉的硫酸銨混合物中分別加入0.1mol/l、0.5mol/l、1mol/l的草酸溶液，待

5、反應(yīng)充分后加入濃硫酸。經(jīng)過(guò)試驗(yàn)結(jié)果分析得出:草酸溶液的加入不能消除亞硝酸鈉對(duì)粗蛋白質(zhì)測(cè)定的影響，所測(cè)出的硫酸銨中的氮含量與亞硝酸鈉的添加量仍然呈現(xiàn)一定的線性關(guān)系。
　　為了對(duì)飼料中亞硝酸鹽含量進(jìn)行有效的檢測(cè)，首先要確定比較可靠、準(zhǔn)確的測(cè)定方法。飼料中亞硝酸鹽的測(cè)定方法分別為GB/T13085-2005版和GB13085-91版兩種。試驗(yàn)采用兩版國(guó)標(biāo)法對(duì)同一樣品進(jìn)行檢測(cè)，分別對(duì)兩種方法的準(zhǔn)確度和精確度進(jìn)行比較。同時(shí)對(duì)2005版前處理