RECK在盆腔臟器脫垂患者盆底組織中子宮主韌帶和陰道前壁中表達意義的研究.pdf

1、目的:檢測女性盆腔臟器脫垂(pop)患者子宮主韌帶和陰道前壁中RECK的表達，探討其表達變化與POP發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。
　　 材料與方法:
　　 一、材料
　　 40例POP患者的主韌帶、膨出陰道前壁組織及10例非脫垂患者的主韌帶及陰道前壁組織來自2009年3月到2010年3月間中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院婦科手術(shù)切除的組織。所有組織均經(jīng)福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋。
　　 二、主要試劑
　　 兔抗人RE

2、CK單克隆抗體購自武漢博士德公司。S-P試劑盒及DAB顯色試劑盒均購自北京中杉金橋生物公司。
　　 三、方法
　　 采用免疫組織化學(xué)染色方法，按鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶(S-P)法行免疫組織化學(xué)染色。切片常規(guī)脫蠟至水，高溫高壓進行抗原修復(fù)，一抗4℃孵育過夜，DAB顯色，蘇木素復(fù)染。用PBS代替一抗作為陰性對照。結(jié)果判定：細胞外基質(zhì)內(nèi)見棕黃色顆粒為陽性表達。評分標(biāo)準：應(yīng)用計算機圖像分析儀分析各組RECK免疫組織化學(xué)染

3、色的陽性區(qū)平均灰度值。在圖像分析中，免疫組織化學(xué)染色的強弱與灰度值成正比關(guān)系，陽性物質(zhì)越高，染色越深，灰度值越大。
　　 四、統(tǒng)計學(xué)分析
　　 采用SPSS13.0軟件包進行統(tǒng)計學(xué)處理。RECK蛋白表達和POP臨床病理特征的關(guān)系用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果:RECK在盆底組織的表達陽性呈黃色或棕黃色，主要定位于細胞外基質(zhì)，陽性表達呈彌漫性分布，POP組和對照組患者盆底組織中均見RECK

4、陽性表達，RECK在對照組的主韌帶及陰道壁平均灰度值(90.7±2.90;90.3士3.84)明顯高于Ⅱ度、Ⅲ度和Ⅳ度盆腔臟器脫垂患者（86.4士3.44，82.2±3.20，81.9±3.06;86.1士4.35，81.3士4.04，80.2士2.66），差異有統(tǒng)計學(xué)意義；在對照組的平均灰度值與Ⅰ度盆腔臟器脫垂者的平均灰度值未見明顯差異；Ⅲ度和Ⅳ度盆腔臟器脫垂患者中的主韌帶及陰道壁平均灰度值(82.2±3.20，81.9±3.06;8