5-溴尿嘧啶用于中國(guó)對(duì)蝦誘變育種的初步研究.pdf

1、通過(guò)遺傳改良提高中國(guó)對(duì)蝦的生長(zhǎng)、抗病力等經(jīng)濟(jì)性狀表現(xiàn)是對(duì)蝦育種研究的主要目標(biāo)。誘變育種(mutation breeding)具有育種周期短、基因突變頻率高、方法簡(jiǎn)便、能同時(shí)對(duì)多個(gè)性狀進(jìn)行改良等優(yōu)點(diǎn)，在作物、微生物育種中已有廣泛應(yīng)用，在水產(chǎn)動(dòng)物育種中也有相關(guān)研究，但在對(duì)蝦中的應(yīng)用還尚未見(jiàn)報(bào)道。本論文以5.溴尿嘧啶(5-Bromouracil，5-BrUra)為化學(xué)誘變劑，探索了5-溴尿嘧啶處理中國(guó)對(duì)蝦受精卵的使用條件，研究分析了5-溴尿嘧

2、啶誘變處理對(duì)中國(guó)對(duì)蝦的生長(zhǎng)和抗病表現(xiàn)的影響，為對(duì)蝦的化學(xué)誘變育種研究摸索基礎(chǔ)條件和提供技術(shù)參數(shù)。主要研究結(jié)果如下： 利用不同濃度的5―溴尿嘧啶處理不同發(fā)育階段的中國(guó)對(duì)蝦受精卵，統(tǒng)計(jì)孵化率、成活率和變態(tài)率。根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果獲得最佳處理?xiàng)l件，探討5-溴尿嘧啶對(duì)中國(guó)對(duì)蝦幼體發(fā)育的影響。結(jié)果表明，以5-溴尿嘧啶處理中國(guó)對(duì)蝦受精卵，其最佳處理階段為處于原腸期的胚胎，接近半致死條件下的處理濃度和處理時(shí)間的組合分別為0.5mg／mL，6h、

3、0.3mg／mL 15h和0.1mg／mL 24h；分別設(shè)置17℃、20°C和23℃三個(gè)溫度梯度，24、30和36三個(gè)鹽度梯度和7.6、8.1和8.6三個(gè)pH梯度，分析了溫度、鹽度、pH對(duì)5-溴尿嘧啶處理效果的影響。結(jié)果表明，溫度、鹽度對(duì)5-溴尿嘧啶的處理效果影響顯著，而pH對(duì)5-溴尿嘧啶的處理效果不存在顯著影響(P<0.05)；采用0.05mg／mL預(yù)處理處于原腸期的中國(guó)對(duì)蝦受精卵3h，0.5mg／mL后處理6h，其孵化率顯著高于僅用

4、0.5mg/mL處理6h的處理組，表明低濃度的5-溴尿嘧啶預(yù)處理可以顯著提高受精卵的孵化率；對(duì)幼體發(fā)育的觀察分析表明，5-溴尿嘧啶能影響中國(guó)對(duì)蝦幼體的前期發(fā)育，但不顯著影響溞Ⅲ至仔蝦期間的幼體發(fā)育，經(jīng)5－溴尿嘧啶處理后孵化出來(lái)的幼體能夠正常變態(tài)。根據(jù)半致死條件下獲得的處理濃度和處理時(shí)間組合并對(duì)其略作調(diào)整，分別以0.3mg／mL 16h(記為0.3-16)和0.5mg／mL 9h(0.5-9)為處理濃度和處理時(shí)間批量處理中國(guó)對(duì)蝦受精卵，獲

5、得0.3-16和0.5-9兩個(gè)處理組。通過(guò)對(duì)蝦白斑綜合癥病毒(White Spot Syndrome Virus，WSSV)感染實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，對(duì)照組、0.3-16處理組和0.5-9處理組感染后的存活時(shí)間分別為(81.45±2.98)h、(74.57±2.88)h和(77.20±3.71)h。采用Kaplan-Meier方法對(duì)三個(gè)實(shí)驗(yàn)組的存活率進(jìn)行生存估計(jì)分析，對(duì)數(shù)秩檢驗(yàn)(Log-Rank test)結(jié)果表明，處理組與對(duì)照組在各時(shí)間點(diǎn)上

6、的累計(jì)存活率不存在顯著差異，說(shuō)明在本實(shí)驗(yàn)條件下5-溴尿嘧啶處理并不能提高中國(guó)對(duì)蝦對(duì)WSSV的抵抗能力。 將5-溴尿嘧啶處理組和對(duì)照組的中國(guó)對(duì)蝦混養(yǎng)，測(cè)定頭胸甲長(zhǎng)(CL)、頭胸甲寬(CW)、2-3腹節(jié)長(zhǎng)(A2-3L)、2-3腹節(jié)寬(A2-3W)、體長(zhǎng)(BL)、體重(W)6個(gè)指標(biāo)，計(jì)算了各性狀間的相關(guān)系數(shù)。采用通徑分析方法對(duì)各性狀的影響大小進(jìn)行剖分。結(jié)果表明，在對(duì)照組中，頭胸甲長(zhǎng)對(duì)體重的直接影響最大，而在0.3-16、0.5-9處理

7、組中，體長(zhǎng)對(duì)體重的直接影響最大。經(jīng)顯著性分析，剔除與體重多元相關(guān)不顯著的性狀，分別建立了體重與剩余性狀的回歸方程：對(duì)照組為Y=0.985X1+2.150X3+0.808X5-7.582；0.3-16處理組為Y=1.374X1+2.866X2+2.121X3+1.352X5-13.071；0.5-9處理組為Y=4.675X2+1.947X3+5.412X4+0.561X5-9.610。 定期取樣測(cè)量三個(gè)實(shí)驗(yàn)組的體長(zhǎng)和體重，計(jì)算體重