氯喹防治CpG DNA介導(dǎo)SIRS的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的全身炎癥反應(yīng)綜合征(Systemic inflammatory response syndrome,SIRS)是嚴(yán)重?zé)齻?、?chuàng)傷的常見并發(fā)癥,病死率較高,進(jìn)一步研究SIRS的發(fā)病機(jī)制及防治措施迫在眉睫.氯喹已有60多年的臨床應(yīng)用歷史,是治療瘧疾癥狀發(fā)作的最有效的藥物.氯喹還用于治療一些自身免疫性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡等,作用機(jī)制可能與其抑制單核/巨噬細(xì)胞釋放致炎細(xì)胞因子如TNF-α、IL-6等有關(guān).該研究旨在明確氯喹對(duì)SIRS

2、模型小鼠的保護(hù)作用的基礎(chǔ)上,研究氯喹拮抗SIRS的作用機(jī)制,為氯喹的老藥新用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).方法①建立小鼠SIRS模型,觀察氯喹的保護(hù)作用;②分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞(hPBMC),用細(xì)菌DNA、CpG ODN和LPS誘導(dǎo)hPBMC釋放TNF-α和IL-6,觀察氯喹的抑制作用,并明確其量效、時(shí)效關(guān)系;ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清TNF-α和IL-6的含量;③流式細(xì)胞術(shù)觀察氯喹對(duì)6-FAM CpG ODN在人單核細(xì)胞內(nèi)聚集的影響,闡明氯喹對(duì)細(xì)胞內(nèi)

3、體成熟的抑制作用;④電泳遷移率改變分析(EMSA)方法觀察氯喹對(duì)細(xì)胞NF-κB激活的抑制作用.結(jié)果①30mg/kg氯喹顯著降低細(xì)菌DNA、CpG ODN、LPS和滅活大腸桿菌攻擊小鼠的死亡率,死亡率由90﹪降低至50﹪、85﹪降低至45﹪、95﹪降低至65﹪以及90﹪降低至60﹪;②氯喹抑制細(xì)菌DNA、CpG ODN和LPS誘導(dǎo)hPBMC釋放TNF-α和IL-6,呈明顯的量效和時(shí)效關(guān)系;③氯喹顯著增強(qiáng)6-FAM CpG ODN在單核細(xì)胞