痢疾桿菌入侵及粘膜免疫特點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、痢疾桿菌是細(xì)菌性痢疾的致病菌.LPS-O多糖和Ipa蛋白是其菌膜上兩類重要的毒力相關(guān)抗原分子.既往研究發(fā)現(xiàn)分別單獨(dú)表達(dá)這兩類抗原的克隆株或突變株均無毒力,只有兩類抗原都完整表達(dá)的毒株才能引起豚鼠角結(jié)膜炎(Ser+),引起人痢疾桿菌感染.該研究室以痢疾桿菌F2a-12菌膜的不同純化組份為免疫原,獲得了抗LPS-O多糖,包括抗型Ⅱ、群3、4的3A6和抗群3、4的1G8、2A3以及抗IpaB蛋白的單克隆抗體.這兩類抗原的單抗對(duì)痢疾桿菌的致病性

2、有無阻斷作用?這正是該課題的研究目的.該研究以抗hCD44的單抗6B1作為與菌膜抗原無關(guān)的單抗對(duì)照,以接觸性溶血、入侵HeLa細(xì)胞及豚鼠角結(jié)膜炎等生物表型與細(xì)胞和動(dòng)物為模型,通過透射、掃描電鏡及激光共聚焦顯微鏡等技術(shù)與方法,來觀察不同類型的單抗對(duì)LPS-O多糖和IpaB蛋白兩種重要毒力相關(guān)抗原分子生物活性的影響,對(duì)F2a-12入侵HeLa細(xì)胞及其對(duì)細(xì)胞骨架的影響進(jìn)行了形態(tài)學(xué)觀察,研究發(fā)現(xiàn):1.抗LPS-O多糖即識(shí)別型Ⅱ、群3、4抗原的單

3、抗3A6能有效地阻斷痢疾菌毒株的接觸性溶血活性,識(shí)別IpaB的單抗無明顯阻斷活性;2.抗LPS-O多糖單抗3A6和抗IpaB單抗17G2均不能阻斷痢疾桿菌入侵HeLa細(xì)胞,反能明顯促進(jìn)痢疾桿菌毒株入侵HeLa細(xì)胞,提高了痢疾菌的細(xì)胞感染率和入侵菌數(shù),同時(shí)發(fā)現(xiàn)在入侵過程中HeLa細(xì)胞的細(xì)胞骨架發(fā)生了顯著重排;3.上述兩種單抗加重了F2a-12對(duì)豚鼠角膜的炎癥反應(yīng);4.抗CD44單抗能明顯阻斷痢疾桿菌入侵HeLa細(xì)胞.從不同角度、不同層次的