依達(dá)拉奉、異丙酚聯(lián)合后處理對乳鼠離體腦皮質(zhì)細(xì)胞缺血再灌注損傷保護作用的研究.pdf

1、目的:研究不同時間窗聯(lián)合應(yīng)用100μmol/L依達(dá)拉奉及3mg/L異丙酚后處理對乳鼠離體腦皮質(zhì)細(xì)胞缺血-再灌注損傷的保護作用。
　　方法:取出生24小時以內(nèi)新生SD乳鼠腦皮質(zhì)細(xì)胞，體外原代培養(yǎng)至第七天，隨機分為6組:A組（正常對照組）;B組（聯(lián)合藥物24小時對照組）;C組（谷氨酸損傷組）;D1組（再灌注后30分鐘內(nèi)依達(dá)拉奉、異丙酚聯(lián)合后處理30分鐘組）;D2組（再灌注后2小時依達(dá)拉奉、異丙酚聯(lián)合后處理組）;D3組（再灌注后12小時

2、依達(dá)拉奉、異丙酚聯(lián)合后處理組）。B組培養(yǎng)至第7天換用依達(dá)拉奉、異丙酚培養(yǎng)基培養(yǎng)24小時后再換用正常培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24小時;C、D1、D2、 D3組培養(yǎng)至第7天予200μ mol/L谷氨酸損傷30分鐘，然后C組換用正常培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24小時，D1組在再灌注后予依達(dá)拉奉、異丙酚混合培養(yǎng)基處理30分鐘，D2組在再灌注后2h予依達(dá)拉奉、異丙酚混合藥物培養(yǎng)基處理30分鐘，D3組在再灌注后12h予依達(dá)拉奉、異丙酚混合藥物培養(yǎng)基處理30分鐘，其后三組

3、均換用正常培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24小時后觀察神經(jīng)細(xì)胞存活率（MTT法），測定乳酸脫氫酶(LDH)漏出率、超氧化物歧化酶(SOD)活力、ATP酶活力、丙二醛(MDA)含量、細(xì)胞凋亡率和HE染色后倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化。
　　結(jié)果:正常對照組神經(jīng)細(xì)胞存活率高于損傷組（P＜0.05）及后處理各組（P＞0.05），細(xì)胞凋亡率明顯低于損傷組及后處理各組(P＜0.01)，LDH漏出率低于損傷組(P＜0.05)及后處理各組（P＞0.05），

4、SOD活力明顯高于損傷組及后處理各組（P＜0.01），ATP活力高于損傷組及2h和12h后處理組(P＜0.01)，也高于30分鐘后處理組（P＞0.05）;MDA含量低于損傷組（P＜0.05）及后處理各組（P＞0.05）。同時，依達(dá)拉奉、異丙酚兩種藥物聯(lián)合30分鐘后處理組神經(jīng)細(xì)胞存活率高于損傷組（P＜0.05）和其他后處理組（P＞0.05），細(xì)胞凋亡率低于損傷組（P＜0.01）及其他后處理組(P＜0.05); LDH漏出率低于損傷組（P＜

5、0.05），雖低于其他后處理組（P＞0.05），無統(tǒng)計學(xué)意義;SOD活力明顯高于損傷組及12h后處理組(P＜0.01);雖高于2h后處理組（P＞0.05），無統(tǒng)計學(xué)意義。ATP活力高于損傷組（P＜0.05）及其他后處理（P＞0.05）;MDA含量低于損傷組(P＜0.05)及其他后處理各組（P＞0.05）。2h后處理組和12h后處理組神經(jīng)細(xì)胞存活率都不同程度高于損傷組，LDH漏出率、MDA含量和細(xì)胞凋亡率較損傷組低，SOD活力、ATP酶活

6、力較損傷組高，但與損傷組相比較P＞0.05，且2h后處理組和12h后處理組相比較P＞0.05。HE染色后倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)見藥物聯(lián)合30分鐘后處理組細(xì)胞形態(tài)受損較損傷組和其他后處理組輕。
　　結(jié)論:在乳鼠離體腦皮質(zhì)細(xì)胞缺血再灌注后2h、12h給予100μmol/L依達(dá)拉奉及3mg/L異丙酚兩種藥物聯(lián)合后處理對缺血再灌注損傷的腦細(xì)胞所產(chǎn)生的保護作用不明顯;而在腦細(xì)胞缺血再灌注后30分鐘內(nèi)予以100μmol/L依達(dá)拉奉及3m