特異性轉(zhuǎn)錄因子在正常小鼠和糖尿病小鼠胰島內(nèi)的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的： 1．建立STZ誘導(dǎo)的C57BL/6小鼠糖尿病模型并觀察其血糖變化。 2．通過對(duì)正常小鼠、STZ注射小鼠和NOD自發(fā)糖尿病小鼠胰腺組織病理學(xué)、免疫組織化學(xué)表現(xiàn)的相互比較，討論其意義。 3．初步探討胰島β細(xì)胞受損后的自我修復(fù)機(jī)制。 方法： 選用6～8周齡C57/BL6小鼠建立STZ小鼠組和正常小鼠組，選用NOD小鼠建立NOD自發(fā)糖尿病小鼠組。觀察各組小鼠胰腺組織HE染色的特點(diǎn)。應(yīng)用免疫熒光染色

2、觀察胰腺內(nèi)分泌細(xì)胞標(biāo)志insulin、glucagon，以及胰腺內(nèi)分泌前體細(xì)胞分化的特異性轉(zhuǎn)錄因子Ngn3、Nkx2.2、Nkx6.1在各組小鼠胰腺組織中的分布情況。 結(jié)果： 1. STZ注射后大多數(shù)小鼠出現(xiàn)明顯的血糖升高(5/7)，少數(shù)小鼠血糖未升高(2/7)。 2．HE染色：糖尿病小鼠和正常小鼠相比，胰島細(xì)胞數(shù)目明顯減少。 3．免疫熒光染色： ①糖尿病小鼠與正常小鼠相比，胰腺中instllin

3、陽性細(xì)胞明顯減少，而glucagon陽性細(xì)胞則明顯增多。 ②在STZ小鼠胰腺中發(fā)現(xiàn)少量的insulin+glucagon雙陽性細(xì)胞和Ngn3陽性細(xì)胞。 ③糖尿病小鼠(血糖升高的STZ小鼠與NOD自發(fā)糖尿病小鼠)和血糖正常小鼠(正常小鼠與血糖未升高的STZ小鼠)相比，胰腺中Nkx2.2在instulin陽性細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)明顯減少。并且在STZ小鼠胰腺中，還發(fā)現(xiàn)Nkx2.2在glucagon陽性細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，但在正常小鼠和NOD

4、自發(fā)糖尿病小鼠胰腺中沒有觀察到該現(xiàn)象。 ④血糖正常小鼠的胰腺中Nkx6.1在大部分insulin陽性細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，而在糖尿病小鼠胰腺中Nkx6.1陽性細(xì)胞明顯減少甚至缺失。 結(jié)論： 1．糖尿病小鼠的血糖升高可能是由于胰島β細(xì)胞絕對(duì)數(shù)量的減少，β細(xì)胞和α細(xì)胞數(shù)量的比例倒置所致。 2．成體小鼠胰腺中有干細(xì)胞樣特性的細(xì)胞存在。 3．Nkx6.1是成熟胰島β細(xì)胞的標(biāo)志之一，Nkx2.2可能需要未知的轉(zhuǎn)錄因子