間尼索地平對L-甲狀腺素誘發(fā)大鼠心肌肥厚的治療作用及其機(jī)制研究.pdf

1、心肌肥厚是高血壓病的常見并發(fā)癥，也是不依賴于血壓的引起心血管疾病的危險因素，是許多心血管疾病共有的病理過程，容易導(dǎo)致心肌缺血、心律失常、心衰及猝死。流行病學(xué)及大量臨床研究表明，有高血壓史的患者患心衰的危險性比沒有高血壓史的個體至少高出6倍。因此，在高血壓的治療過程中，降壓已經(jīng)不是唯一目的，同時應(yīng)盡可能延緩心肌肥厚，減輕心肌結(jié)構(gòu)的有害改變，能否逆轉(zhuǎn)心肌肥厚也成為評價降壓藥物療效的一個重要指標(biāo)。目前臨床上用于治療心肌肥厚的藥物主要有血管緊張

2、素轉(zhuǎn)化酶抑制劑和鈣拮抗劑。事實(shí)證明鈣拮抗劑具有良好的抗心肌肥厚的作用。因此開發(fā)新型鈣拮抗劑具有廣泛的臨床意義，并給臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 間尼索地平(m-Nis)是該校藥學(xué)院有機(jī)化學(xué)教研室首創(chuàng)合成的二氫吡啶類鈣拮抗劑，為尼索地平的同分異構(gòu)體。其主要作用是松弛血管平滑肌，通過擴(kuò)張外周血管降壓。本室以前的研究表明，其能降低正常血壓麻醉犬、麻醉家兔、清醒家兔及清醒腎性高血壓大鼠和腎性高血壓犬的血壓。但m-Nis對心肌肥厚是否具有治療作

3、用尚屬未知。本實(shí)驗(yàn)通過腹腔注射L-甲狀腺素(Thy)，造成大鼠心肌肥厚模型，觀察長期給予不同劑量m-Nis是否能降低心肌肥厚程度，從而保護(hù)心肌細(xì)胞，并初步分析其作用機(jī)制。 一、m-Nis對心肌肥厚的影響目的：通過給造模后的大鼠灌胃不同劑量的m-Nis，探討m-Nis對心肌肥厚大鼠血壓、左室收縮和舒張功能、心臟重量指數(shù)、左心室重量指數(shù)和心肌顯微結(jié)構(gòu)是否具有改善作用。 方法：用腹腔注射Thy法造成大鼠心肌肥厚模型。取健康SD

4、大鼠，體重200-230g，雄性，隨機(jī)分為6組：(1)正常對照組；(2)溶劑對照組；(3)尼索地平組(4.0mg/kg)；(4)大劑量間尼索地平治療組(4.0mg/kg)；(5)中劑量間尼索地平治療組(2.0mg/kg)；(6)小劑量間尼索地平治療組(1.0mg/kg)。其中除正常對照組外，其余各組大鼠均腹腔注射Thy0.5mg/(kg.d)，連續(xù)7天，建立心肌肥厚模型。m-Nis大劑量組用0.5％羧甲基纖維素鈉溶液做成混懸液，并用其稀

5、釋成中、低劑量組。正常對照組給予等體積的生理鹽水，溶劑對照組給予等體積0.5％羧甲基纖維素鈉溶液。各組均于第8天灌胃給藥，給藥容積為0.5ml/100g體重。連續(xù)灌胃給藥四周。四周后各組均作下述處理：稱重后給大鼠腹腔注射2％戊巴比妥鈉溶液(45mg/kg體重)麻醉，固定，分離右頸總動脈，插入自制聚乙烯導(dǎo)管并和MS4000多媒體信號分析系統(tǒng)相連，穩(wěn)定后記錄右頸總收縮壓(SP)、舒張壓(DP)和平均壓(MBP)。繼續(xù)插入導(dǎo)管至左心室，記錄左

6、室收縮壓(LVSP)，左室舒張末壓(LVDP)以及左心室收縮壓最大上升速率(+dp/dtmax)和左心室舒張壓最大下降速率(-dp/dtmax)的值。記錄后開胸，迅速取心臟，生理鹽水中洗掉余血，用濾紙吸干心臟表面水份，稱取并記錄心臟重量。計算心臟重量指數(shù)：心臟重量(HW)與體重(BW)的比值(HW/BW)，剪除心房和右心室，留下左心室和游離壁，稱取并記錄其重量，計算左心室重量指數(shù)：左心室重(LVW)與體重(BW)的比值(LVW/BW)。

7、然后用固定液固定，常規(guī)石蠟包埋，制成6微米厚的普通切片，HE染色，鏡下放大400倍，測量20根心肌纖維(MF)的直徑，其均值作為該大鼠心肌纖維直徑(MFD)的大小，進(jìn)行顯微照相。 結(jié)論：m-Nis對L-甲狀腺素引起的大鼠心肌肥厚有降低血壓，改善左心室收縮和舒張功能，減低左室重量指數(shù)和心肌纖維直徑的作用。 二、m-Nis降低Thy誘導(dǎo)的心肌肥厚大鼠左心室肌細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度的作用目的：測量各組大鼠左心室肌細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子

8、濃度，探討m-Nis是否具有降低鈣超載的作用。 方法：如前所述制備模型并給藥，四周末，大鼠稱重后腹腔注射2％戊巴比妥鈉麻醉(45mg/kg)，開胸后迅速取心臟，于冰冷無鈣臺式液中洗凈余血，Langendorf離體工作裝置上恒流灌流，灌流液預(yù)先通以純氧飽和，先以無鈣臺氏液灌流5分鐘，待心臟停跳后用含酶液灌流約12-15分鐘，致心臟變軟，棄去心房和右心室，吹打剩余部分，使之分散為單個心室肌細(xì)胞，KB液保存，逐級復(fù)鈣，F(xiàn)ura-2/A