油茶粕蛋白水解物與多糖的制備及其生物活性評價(jià).pdf

1、油茶（Camellia oleifera）為我國特有木本油料作物，廣泛分布在我國中部、南部地區(qū)。山茶油由油茶籽提取而來，因其富含不飽和脂肪酸和多種生物活性成分，被譽(yù)為“東方橄欖油”。在山茶油生產(chǎn)過程中，產(chǎn)生了一系列副產(chǎn)物如油茶粕、皂角等。這些副產(chǎn)物常被用作有機(jī)肥和燃料，甚至被當(dāng)作垃圾丟棄，不但沒有產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)效益，反而造成了一定的環(huán)境壓力。因此，充分開發(fā)利用油茶粕具有一定的實(shí)用價(jià)值和開發(fā)意義。蛋白和多糖作為生物大分子，擁有多種生物活性和高的

2、營養(yǎng)價(jià)值，正越來越受到大眾的青睞。油茶粕含有豐富的蛋白和多糖。本文分析了油茶粕蛋白及其蛋白酶水解物的功能特性和抗氧化活性，評價(jià)了油茶粕多糖的抗氧化和抗癌活性。為充分開發(fā)利用油茶粕蛋白和多糖，提高油茶粕經(jīng)濟(jì)價(jià)值，提供理論依據(jù)和方法參考。主要研究結(jié)果如下:
　　1.正交優(yōu)化油茶粕蛋白(SCP)和多糖(COP-c)同時(shí)提取工藝，其正交優(yōu)化提取條件為:堿液pH10，料液比1∶30，提取時(shí)間3h，提取溫度60℃。在此條件下，SCP和COP-

3、c得率分別為4.93±0.13％和4.91±0.09％。
　　2.油茶粕蛋白(SCP)經(jīng)超濾分成分子量不同的兩部分組分(≥10 kDa和＜10kDa)。超濾組分＜10 kDa擁有良好的持油性，但持水性較差，而超濾組分≥10 kDa則相反。SCP同超濾組分＜10 kDa一樣，擁有良好的蛋白溶解性，但泡沫穩(wěn)定性較差;超濾組分≥10 kDa顯示出良好的泡沫穩(wěn)定性和乳化性;pH和溫度對其功能特性的影響因分子量不同而不同，超濾組分＜10 k

4、Da的較耐高溫，80℃下依然擁有良好的乳化穩(wěn)定性，但酸性環(huán)境中其乳化穩(wěn)定性和泡沫穩(wěn)定性較弱。SCP與其超濾組分在60℃表現(xiàn)出最好的蛋白溶解性和乳化性。
　　3.采用堿性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶等五種蛋白酶分別水解SCP制備蛋白水解物(SCPH)，并分析了SCPH的分子量分布、功能特性和抗氧化活性。結(jié)果顯示酶水解能顯著提高蛋白溶解性，但損害了蛋白起泡性和乳化性。堿性蛋白酶制備的SCPH擁有最高水解度(DH

5、)和最好的抗氧化活性，同時(shí)在較寬的pH環(huán)境中均有良好的蛋白溶解性。風(fēng)味蛋白酶制備的SCPH有低的多肽分子量分布，但擁有最好的銅離子螯合能力和乳化穩(wěn)定性。胰蛋白酶處理SCP的起泡性較SCP本身的好。表明蛋白酶類型影響蛋白水解物的分子量分布、功能特性和抗氧化活性。
　　4.采用堿性蛋白酶制備不同DH（10％、20％、30％和40％）的SCPH，并分析其功能特性和抗氧化活性。隨著水解進(jìn)行，DPPH清除活性隨水解時(shí)間延長呈先升后趨于平衡趨

6、勢，銅離子螯合能力則隨水解時(shí)間延長而降低，鐵離子螯合能力和超氧陰離子清除活性呈先升后降趨勢。蛋白溶解性、起泡性和乳化性受pH和DH值的影響。 DH≤30％的SCPH擁有良好的蛋白功能特性，而進(jìn)一步水解(DH40％)將嚴(yán)重?fù)p害蛋白功能特性。DH20％和30％ SCPH擁有良好的抗氧化活性和功能特性。因此，可以通過選擇合適的蛋白酶類型和控制DH來制備擁有良好生物活性和功能特性的蛋白水解物。
　　5.油茶粕粗多糖(COP-c)經(jīng)超濾分成

7、4種不同分子量的組分，并經(jīng)DEAE離子纖維素樹脂和葡聚糖凝膠G-100純化得4種不同多糖COP-1、COP-2、COP-3和COP-4。其分子量分別為7.9、36、83和225 kDa，并擁有類似的紅外光譜。COP-2和COP-3擁有最好的自由基清除活性。COP-1的金屬螯合能力最好。COP-4擁有最差的抗氧化活性和金屬螯合能力。表明多糖生物活性受其分子量影響，中等分子量的油茶粕蛋白擁有最好的抗氧化活性，低分子量則表現(xiàn)最好的金屬螯合能力