鏈霉菌多糖發(fā)酵及其生物活性分析.pdf

1、鏈霉菌以產(chǎn)生抗生素而著名，而關(guān)于鏈霉菌產(chǎn)多糖的研究目前鮮見(jiàn)報(bào)道。本論文從數(shù)千株鏈霉菌中篩選到一株能產(chǎn)胞外多糖的菌株，并對(duì)該鏈霉菌多糖（streptomyces polysaccharide，SPS）進(jìn)行了分離純化與鑒定；研究了該菌株產(chǎn)胞外多糖的發(fā)酵工藝及其抗菌、抗氧化與抗腫瘤的生物活性。主要內(nèi)容包括： 1）多糖的分離純化 （1）對(duì)多糖進(jìn)行分離純化 采用95﹪乙醇醇析從發(fā)酵液中分離出粗多糖，再用分段鹽析法

2、去處蛋白質(zhì)，透析除去小分子物質(zhì)得到多糖半純品；然后用Sephadex G-75分離純化。 （2） 紫外光譜分析表明多糖樣品不含蛋白質(zhì)和核酸，硫酸-蒽酮法檢測(cè)表明多糖樣品純度為96.2﹪。 （3）紅外光譜對(duì)多糖樣品進(jìn)行分析結(jié)果表明，多糖樣品在4000 cm-1～700 cm-1具有明顯的糖吸收峰；單糖是以吡喃糖苷的形式存在，可能有甘露糖，不含α-糖苷鍵，而含β-糖苷鍵。 （4）利用GC-MS分析多糖的單糖組

3、分進(jìn)行分析結(jié)果表明：多糖是由甘露糖、葡萄糖、半乳糖三種單糖組成的，其組成比例約為2：1：1。 （5）利用Sephadex G-150凝膠柱層析法測(cè)得多糖相對(duì)分子質(zhì)量約為68，000 D。 （6）高碘酸氧化、Smith降解對(duì)多糖結(jié)構(gòu)分析表明，糖苷鍵的連接方式可能有(1 3) 和(1 6)。 2）通過(guò)單因子試驗(yàn)和正交試驗(yàn)，確定了鏈霉菌的發(fā)酵培養(yǎng)基成分和最佳發(fā)酵條件 發(fā)酵培養(yǎng)基成分為：葡萄糖3﹪，淀粉4

4、﹪，豆餅粉4﹪，硫酸銨0.8﹪，硫酸鎂0.1﹪，磷酸氫二鉀0.4﹪，氯化鈉1.0﹪，碳酸鈣0.03﹪，初始pH7.4～7.6。 發(fā)酵條件為：種子的種齡為48h，接種量為10﹪，培養(yǎng)溫度為30℃，發(fā)酵時(shí)間為168h，搖床轉(zhuǎn)速為200rpm以上，此時(shí)，多糖的產(chǎn)量可達(dá)25.5 g/L。 3）采用藥理學(xué)的試驗(yàn)方法，研究多糖的抗菌、抗氧化、抗腫瘤等生物活性。 結(jié)果表明，該多糖具有較廣的抗菌譜、抗菌能力強(qiáng)；對(duì)鄰苯三酚自