通心絡(luò)對糖尿病合并缺血性腦損傷大鼠胰島素樣生長因子-1表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、前言: 糖尿病是一種慢性代謝性疾病，目前對糖尿病患者威脅較大的是各種并發(fā)癥，其中主要為糖尿病并發(fā)腦梗死。 目前，神經(jīng)保護(hù)劑的使用及其對缺血再灌注損傷的保護(hù)作用日益受到人們的重視。通心絡(luò)膠囊是吳以嶺教授首創(chuàng)運(yùn)用中醫(yī)絡(luò)病理論研制而成的中藥復(fù)方制劑，具有益氣活血、通絡(luò)止痛之功效。用于治療缺血性腦血管病具有一定的臨床療效。 以往研究表明胰島素樣生長因子-1(Insulin-like growth factor-1，IGF

2、-1)是種結(jié)構(gòu)與胰島素類似的多肽類神經(jīng)營養(yǎng)因子，可調(diào)節(jié)神經(jīng)細(xì)胞的生長和分化，對維持成年腦的正常功能起著重要作用。 本課題通過研究糖尿病合并腦缺血損傷后大鼠的胰島素樣生長因子-1的表達(dá)及通心絡(luò)的影響來探討通心絡(luò)對于糖尿病合并腦缺血損害的保護(hù)機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)方法: 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和分組 雄性健康的Wistar大鼠48只，均做成糖尿病模型，隨機(jī)分成4組：對照組(n=12)、假手術(shù)組(n=12)、MCAO組(n=2)和

3、TXL干預(yù)組(n=12)。 2、建立動(dòng)物模型 (1)糖尿病模型：雄性健康的Wistar大鼠經(jīng)腹腔注射四氧嘧啶200mg/kg，4天后用快速血糖測試儀測定血糖，空腹血糖超過11.1mmol/L者為造模成功。 (2)MCAO模型：造模成功的糖尿病大鼠采用改良線栓法建立大腦中動(dòng)脈閉塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型，兩小時(shí)后再灌注。假手術(shù)組插線深度為10mm，其余步驟均

4、與MCAO組相同。 3、測算腦梗死體積百分比 每組各隨機(jī)取6只大鼠，斷頭取腦后進(jìn)行TTC染色。顯微圖像分析系統(tǒng)采集、分析圖像，計(jì)算腦體積及腦梗死體積，以腦梗死體積除以腦體積求得腦梗死體積百分比． 4、檢測IGF-1的表達(dá) 各組其余6只大鼠，采用免疫組化法檢測IGF-1的表達(dá)情況。顯微圖像分析系統(tǒng)采集圖像，細(xì)胞漿中呈棕黃色顆粒者為陽性細(xì)胞，分析陽性細(xì)胞面積百分比。 5、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 各組數(shù)據(jù)均

5、以x±s表示，采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析及t檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果: 1、腦梗死體積百分比對照組及假手術(shù)組均未見梗死灶，MCAO組腦梗死體積百分比顯著大于TXL組(P<0.01)。 2、光鏡觀察 對照組和假手術(shù)組大鼠腦標(biāo)本肉眼及光鏡下均未見異常改變。MCAO組和TXL組大鼠腦標(biāo)本左側(cè)額頂葉可見不同程度的變軟和腫脹，光鏡下可見不同程度的缺血性變性壞死，TXL組的改