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文檔簡介
1、目的:利用新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage HIBD)動物模型,觀察HIBD后不同時間點腦細胞形態(tài)的變化,以及轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)的表達變化,從而探討TGF-β1與HIBD之間可能存在的關(guān)系,為兒科臨床新生兒缺氧缺血性腦病的相關(guān)預防和治療提供實驗和理論的依據(jù)。 方法:7日齡Wistar大鼠48只,雌雄不限,體重12-18g,隨機分為2組:對照組(8只),實行假手術(shù),
2、只游離右側(cè)頸總動脈不結(jié)扎,不作缺氧處理;HIBD模型組(40只,采用Rice法制備HIBD模型),根據(jù)處死動物的時間不同,又隨機分為HIBD后12h組,24 h組,72 h組,5d組,7 d組,共5個亞組,每組8只。各組在其相應的時間點斷頭處死并取腦組織,用于常規(guī)病理分析及免疫組化染色檢測大腦皮層TGF-β1表達。采用BI-2000醫(yī)學圖象分析系統(tǒng)進行圖象采集與分析,在相同的光亮強度和放大倍數(shù)(10×40)條件下統(tǒng)計陽性細胞平均灰度值,
3、數(shù)據(jù)以-x±s表示。用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析。 結(jié)果:①實驗前各組新生大鼠行為能力正常,模型制做過程中全部發(fā)生了不同程度的異常改變。對照組未出現(xiàn)上述行為異常。②HE染色:光鏡下,對照組腦組織各部位的結(jié)構(gòu)及細胞層次清楚、形態(tài)正常,無神經(jīng)細胞缺失;HIBD組術(shù)后12小時可見神經(jīng)元胞體腫脹,72小時腫脹明顯,細胞排列紊亂,5-7天細胞壞死明顯,神經(jīng)元數(shù)量明顯減少,正常排列結(jié)構(gòu)消失,有空泡形成。③免疫組化染色:對照組,未出現(xiàn)明
4、顯的TGF-β1免疫組化陽性細胞;HIBD模型組,TGF-β1的表達先上升后下降,高峰在72h組。HIBD模型組各時間點分別與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);HIBD模型組各時間點比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。 結(jié)論:大量文獻已證實,TGF-β1是一種具有多功能的細胞因子,可以通過多種途徑減輕HIBD,從而發(fā)揮對腦組織的保護及修復作用。本實驗結(jié)果提示HIBD后,所測目標TGF-β1的表達隨著病變的進展有明顯上
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