血管緊張素Ⅱ受體不同亞型對(duì)心力衰竭大鼠心電穩(wěn)定性及心室肌細(xì)胞鉀通道電流的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、在心力衰竭患者死亡原因中，心臟性猝死(suddencardiacdeath，SCD)可達(dá)50％，大多為室性心動(dòng)過(guò)速或心室顫動(dòng)所致。分子生物學(xué)的進(jìn)展，已基本明確心肌重構(gòu)是心力衰竭發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制之一，尤其在心肌梗死后。神經(jīng)內(nèi)分泌長(zhǎng)期激活是心肌重構(gòu)的基本原因。其中，腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(rennin-angiotensin-aldosteronesystem，RAAS)的激活是促進(jìn)心力衰竭發(fā)生和發(fā)展的重要機(jī)制。心室肌的結(jié)構(gòu)重構(gòu)與

2、電重構(gòu)使心力衰竭的心電穩(wěn)定性降低，易發(fā)生惡性室性心律失常。心力衰竭病人及動(dòng)物模型的心室肌電重構(gòu)已被廣泛研究，無(wú)論何種原因?qū)е碌男牧λソ撸湫氖壹〖?xì)胞均發(fā)現(xiàn)標(biāo)志性的有效不應(yīng)期(effectiverefractoryperiod，ERP)及動(dòng)作電位時(shí)程(actionpotentialduration，APD)延長(zhǎng)。目前認(rèn)為鉀離子通道電流的變化導(dǎo)致心力衰竭心室肌細(xì)胞復(fù)極異常是心臟性猝死的重要機(jī)制。如何糾治異常的心室肌電重構(gòu)成為SCD防治中尚待

3、解決的課題。而血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑、血管緊張素Ⅱ1型受體阻滯劑在循證醫(yī)學(xué)研究中表現(xiàn)出降低心力衰竭患者SCD的效應(yīng)開啟了人們對(duì)血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)及其受體在心力衰竭電生理作用方面的關(guān)注。AngⅡ及其受體對(duì)心電生理的直接效應(yīng)也成為心力衰竭電重構(gòu)研究中的熱點(diǎn)。越來(lái)越多的證據(jù)表明AngⅡ可以直接調(diào)控離子通道，改變心臟的電生理特性，產(chǎn)生致心律失常效應(yīng)，并可觸發(fā)SCD。盡管AngⅡ在正常心室肌的電生理研究有諸多報(bào)道，

4、但心力衰竭時(shí)循環(huán)及心臟局部AngⅡ水平增高，心室血管緊張素Ⅱ受體不同亞型的表達(dá)也發(fā)生了變化，此時(shí)，這種變化的電生理意義、心肌細(xì)胞血管緊張素Ⅱ受體不同亞型介導(dǎo)的電生理特點(diǎn)、以及心肌細(xì)胞血管緊張素Ⅱ受體不同亞型對(duì)鉀離子通道的調(diào)控尚不清楚，需要進(jìn)一步研究。 研究目的 1.采用大鼠心肌梗死后心力衰竭模型，對(duì)左心室非梗死區(qū)血管緊張素Ⅱ受體不同亞型的表達(dá)進(jìn)行研究，可以提供重要的分子生物學(xué)基礎(chǔ)，有助于闡釋受體表達(dá)變化的心電生理效應(yīng)。

5、 2.觀察血管緊張素Ⅱ受體不同亞型阻滯劑、血管緊張素-(1-7)對(duì)心力衰竭大鼠心室有效不應(yīng)期及心室顫動(dòng)閾值的影響，闡明不同血管緊張素Ⅱ受體亞型所介導(dǎo)的效應(yīng)，為心力衰竭中血管緊張素Ⅱ電生理作用機(jī)制提供重要的補(bǔ)充，并為臨床拮抗血管緊張素Ⅱ的心力衰竭治療措施(包括應(yīng)用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑、血管緊張素Ⅱ1型受體阻滯劑)提供電生理理論依據(jù)。 3.采用膜片鉗技術(shù)，研究血管緊張素Ⅱ、血管緊張素-(1-7)對(duì)心力衰竭大鼠心室肌細(xì)胞Ito

6、、Ik的作用。利用血管緊張素Ⅱ受體不同亞型阻滯劑，闡明血管緊張素Ⅱ受體不同亞型對(duì)心力衰竭心室肌細(xì)胞Ito、Ik的調(diào)節(jié)效應(yīng)，進(jìn)一步明確血管緊張素Ⅱ、血管緊張素-(1-7)對(duì)心力衰竭心電生理的作用機(jī)制，而且為調(diào)節(jié)鉀離子通道功能達(dá)到改善心力衰竭的心電穩(wěn)定性提供重要的理論依據(jù)。 第1章.心肌梗死后心力衰竭大鼠心室血管緊張素Ⅱ受體不同亞型的表達(dá)在心血管系統(tǒng)中，主要存在血管緊張素Ⅱ1型受體(angiotensinⅡtype1receptor

7、，AT1-R)和血管緊張素Ⅱ2型受體(angiotensinⅡtype2receptor，AT2-R)。目前研究認(rèn)為，血管緊張素Ⅱ受體的表達(dá)變化影響著心力衰竭心室的結(jié)構(gòu)重構(gòu)，而結(jié)構(gòu)重構(gòu)為心律失常提供基礎(chǔ)，與電重構(gòu)密切相關(guān)。不僅如此，心室肌細(xì)胞的血管緊張素Ⅱ受體還介導(dǎo)了AngⅡ的電生理效應(yīng)。因此，基于本課題選擇的心肌梗死后心力衰竭模型的心電生理研究時(shí)間，明確此時(shí)左心室非梗死區(qū)血管緊張素Ⅱ受體不同亞型的表達(dá)，為研究血管緊張素Ⅱ受體不同亞型介

8、導(dǎo)的心電生理作用提供重要的分子生物學(xué)基礎(chǔ)。 采用大鼠心肌梗死后心力衰竭模型，結(jié)合流式細(xì)胞技術(shù)，對(duì)左心室非梗死區(qū)血管緊張素Ⅱ受體不同亞型的表達(dá)進(jìn)行研究，可以提供重要的分子生物學(xué)基礎(chǔ)，有助于闡釋受體表達(dá)變化的心電生理效應(yīng)。 心肌梗死后心力衰竭大鼠左心室非梗死區(qū)AT1-R表達(dá)降低，AT2-R表達(dá)升高，AT1-R/AT2-R比值降低。 第2章.血管緊張素Ⅱ受體不同亞型阻滯劑、血管緊張素-(1-7)對(duì)心力衰竭大鼠心室有效不

9、應(yīng)期及心室顫動(dòng)閾值的影響在心力衰竭的發(fā)生、發(fā)展中，患者循環(huán)及心室局部AngⅡ增高，是導(dǎo)致心電生理失穩(wěn)態(tài)與心臟性猝死的重要機(jī)制之一。但目前，對(duì)AngⅡ在心力衰竭中致室性心律失常的介導(dǎo)機(jī)制和血管緊張素Ⅱ受體不同亞型所介導(dǎo)的電生理效應(yīng)尚缺乏了解。 本研究旨在觀察血管緊張素Ⅱ受體不同亞型阻滯劑、Ang-(1-7)對(duì)心力衰竭大鼠心室有效不應(yīng)期及心室顫動(dòng)閾值的影響，闡明血管緊張素Ⅱ受體不同亞型所介導(dǎo)的效應(yīng)，為心力衰竭中AngⅡ電生理作用機(jī)制

10、提供重要的補(bǔ)充，并為臨床拮抗AngⅡ的心力衰竭治療措施提供電生理理論依據(jù)。 心力衰竭大鼠左心室非梗死區(qū)VERP延長(zhǎng)，VFT降低。血管緊張素Ⅱ1型受體阻滯劑、血管緊張素-(1-7)可提高心力衰竭大鼠VFT，縮短左心室非梗死區(qū)VERP，改善心力衰竭電重構(gòu)。而血管緊張素Ⅱ2型受體阻滯劑進(jìn)一步降低心力衰竭大鼠VFT，進(jìn)一步延長(zhǎng)左心室非梗死區(qū)VERP，惡化心力衰竭心電生理失穩(wěn)態(tài)。 第3章.血管緊張素Ⅱ受體不同亞型對(duì)心力衰竭大鼠心室

11、肌細(xì)胞鉀離子通道電流的調(diào)節(jié)作用目前研究認(rèn)為心力衰竭時(shí)，心室肌瞬時(shí)外向鉀電流(Ito)、心室肌延遲整流鉀電流(Ik)的下調(diào)是心力衰竭的電重構(gòu)特點(diǎn)之一。目前，血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)、血管緊張素-(1-7)(Ang-(1-7))通過(guò)血管緊張素Ⅱ受體不同亞型調(diào)控心室肌上述兩種鉀通道電流的研究資料大多來(lái)自于正常動(dòng)物，對(duì)心力衰竭心室肌細(xì)胞鉀通道電流的調(diào)節(jié)作用尚罕見(jiàn)研究報(bào)道。 采用膜片鉗技術(shù)，研究AngⅡ、Ang-(1-7)對(duì)心力衰竭大鼠心

12、室肌細(xì)胞Ito、Ik的作用效應(yīng)。利用血管緊張素Ⅱ受體不同亞型阻滯劑，闡明血管緊張素Ⅱ受體不同亞型對(duì)心力衰竭心室肌細(xì)胞Ito、Ik的調(diào)節(jié)作用，進(jìn)一步明確AngⅡ、Ang-(1-7)對(duì)心力衰竭心電生理的作用機(jī)制，而且為調(diào)節(jié)鉀離子通道功能達(dá)到改善心力衰竭的心電穩(wěn)定性提供重要的理論依據(jù)。 結(jié)論 1.1心肌梗死后心力衰竭大鼠左心室非梗死區(qū)AT1-R下調(diào)，AT2-R上調(diào)，AT1-R/AT2-R比值降低。 2.血管緊張素Ⅱ1型

13、受體阻滯劑可改善心力衰竭大鼠心電穩(wěn)定性，提高VFT，提示心力衰竭大鼠心室AT1-R介導(dǎo)了AngⅡ不良的電生理效應(yīng)，促進(jìn)心力衰竭心室電重構(gòu)。血管緊張素Ⅱ2型受體阻滯劑降低心力衰竭大鼠心電穩(wěn)定性，降低VFT，提示心力衰竭大鼠心室AT2-R的激動(dòng)可能改善心力衰竭心室電重構(gòu)，有利于維持心電穩(wěn)定性。 3.血管緊張素Ⅱ受體不同亞型對(duì)心力衰竭大鼠心室肌細(xì)胞鉀通道電流Ito、Ik具有調(diào)節(jié)作用，激動(dòng)AT1-R進(jìn)一步降低心力衰竭心室肌細(xì)胞Ito、I