fkbp12.6過(guò)表達(dá)對(duì)心力衰竭心室肌細(xì)胞收縮功能及離子通道電流的影響

1、中山大學(xué)博士后研究工作報(bào)告X1 0 ；j 5 9 7 0F K B P l 2 ．6 過(guò)表達(dá)對(duì)心力衰竭心室肌細(xì)胞收縮功能及離子通道電流的影響T h e E f f e c t so f F K B P l 2 ．6 O V e r e x p r e s s i o n o n C o n t r a c t i l i t ya n dI o n i c C h a n n e l C u r r e n t o f V e n t

2、r i c u l a r M y o c y t e si nR a t s w i t hH e a r t F a i l u r e博士后：李德流動(dòng)站名：臨床醫(yī)學(xué)博士后流動(dòng)站二級(jí)學(xué)科：內(nèi)科學(xué)( 心血管病)合作導(dǎo)師：伍衛(wèi)教授2 0 0 7 年1 月中山大學(xué)博士后研究- [ 作報(bào)告F K B P l 2 ．6 過(guò)表達(dá)對(duì)心力衰竭心室肌細(xì)胞收縮功能及離子通道電流的影響摘要研究背景：近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，心力衰竭時(shí)心室肌細(xì)胞肌漿網(wǎng)( s a r

3、 e o p l a s m i er e t i c u l u m ，S R ) 鈣( C a ”) 釋放通道的穩(wěn)定性受到破壞，引起S R 明顯的舒張期C a 2 +滲漏。舒張期C a 2 + 滲漏主要導(dǎo)致兩個(gè)嚴(yán)重的后果：一是S RC a 2 + 負(fù)荷減少，以致于收縮期S R C a _ ”釋放減少，導(dǎo)致收縮功能障礙；二是舒張期C a 2 + 異常釋放，激活l N 虻。，導(dǎo)致心肌細(xì)胞復(fù)極異常，從而產(chǎn)生后除極并誘發(fā)室性心律失常，甚至發(fā)

4、生猝死。心力衰竭時(shí)心室肌細(xì)胞S RC a 2 + 釋放通道的穩(wěn)定性受到破壞的原因主要是F K 5 0 6 結(jié)合蛋白1 2 ．6 ( F K 5 0 6 b i n d i n g p r o t e i n l 2 ．6 ，F(xiàn) K B P l 2 ．6 ) 與蘭尼受體( r y a n o d i n e r e c e p t o r2 ，I 時(shí)R 2 )結(jié)合力降低。心力衰竭時(shí)交感神經(jīng)張力長(zhǎng)期增高，通過(guò)c A M P 依賴(lài)蛋白激酶A

5、途徑使R y R 2 高度磷酸化，可導(dǎo)致F K B P l 2 ．6 與R y R 2 結(jié)合力降低。R e i k e n 等發(fā)現(xiàn)B 受體阻滯劑治療可逆轉(zhuǎn)狗心力衰竭心室肌細(xì)胞R y R 2 的結(jié)構(gòu)和功能障礙，增強(qiáng)F K B P l 2 ．6 與R y R 2結(jié)合力，進(jìn)一步闡明了B 受體阻滯劑治療心力衰竭的分子機(jī)制。P r e s t l e 和L o u g h r e y等發(fā)現(xiàn)，上調(diào)兔和大鼠心肌細(xì)胞中F K B P l 2 ．6 的表

6、達(dá)可防止舒張期c a 2 + 滲漏，改善興奮．收縮偶聯(lián)，促進(jìn)心肌細(xì)胞收縮。上述研究表明，F(xiàn) K B P l 2 ．6 結(jié)合力降低導(dǎo)致的S R C a 2 +釋放通道門(mén)控功能障礙是心力衰竭時(shí)心肌收縮力降低及室性心律失常發(fā)生的共同機(jī)制，以F K B P l 2 ．6 為目標(biāo)的干預(yù)可能是心力衰竭和室性心律失常治療的一條新途徑。研究目的：本研究以心力衰竭和室性心律失常的共同機(jī)制一心室肌細(xì)胞C a 2 + 循環(huán)異常為切入點(diǎn)，以S RC a 2 +

7、 釋放通道穩(wěn)定蛋白F K B P l 2 ．6 為干預(yù)目標(biāo)，通過(guò)腺病毒介導(dǎo)F K B P l 2 ．6 過(guò)表達(dá)，探討F K B P l 2 ．6 過(guò)表達(dá)對(duì)心力衰竭心室肌細(xì)胞收縮功能及離子通道電流的影響，為心力衰竭和室性心律失常的防治探索新的途徑。研究方法：①重組腺病毒載體A d ．F K B P l 2 ．6 ．G F P 的構(gòu)建：將平端化的F K B P l 2 ．6片段連接到穿梭質(zhì)粒p A d T r a c k ．C M V 構(gòu)建

8、重組穿梭質(zhì)粒p A d T r a c k ／F K B P l 2 ．6 ；采用電穿孔法將線(xiàn)性化p A d T r a c k ／F K B P l 2 ．6 轉(zhuǎn)化A d E a s i e r - 1 細(xì)菌，產(chǎn)生重組腺病毒質(zhì)粒p A d E a s y ／F K B P l 2 ．6 ；采用脂質(zhì)體介導(dǎo)法用線(xiàn)性化p A d E a s y ／F K B P l 2 ．6 轉(zhuǎn)染H E K 2 9 3細(xì)胞，從病變的H E K 2 9 3