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1、目的: 檢測(cè)角膜新生血管化(Corneal neovascularization,CNV)及急性排斥反應(yīng)兔角膜細(xì)胞間粘附分子-1(Intercellular adhesion Molecule-1,ICAM-1)的分布與表達(dá)。檢測(cè)可溶性細(xì)胞間粘附分子-1(Soluble intercellular adhesion Molecule-1,sICAM-1)在急性排斥反應(yīng)中含量的動(dòng)態(tài)變化,探討高危角膜移植術(shù)后ICAM-1含量變化與排
2、斥反應(yīng)的關(guān)系,尋找一種預(yù)測(cè)排斥反應(yīng)的新方法。 方法: 健康新西蘭白兔20只右眼用角膜縫線法制作角膜新生血管化(Corneal neovascularization,CNV)模型后,制作穿透性角膜移植模型(Penetrating keratoplasty)4組,A組:正常對(duì)照組4只;B組:自體穿透性角膜移植組8只;C組:同種異體穿透性角膜移植組8只; D組:新生血管化角膜穿透性移植組8只,術(shù)后角膜新生血管(Corneal
3、neovascularization,CNV)生長(zhǎng)情況進(jìn)行評(píng)分;記錄植片存活時(shí)間;比較各組移植排斥指數(shù)(Rejiection index,RI),包括角膜植片透明度、水腫、和新生血管程度;術(shù)后第3、第7、第14、第21、第28天采取耳緣動(dòng)脈血(約0.8ml),取血清,保存。排斥反應(yīng)發(fā)生前(約術(shù)后第10天)B、C、D組各取4只兔子,A組取2只兔子,抽取房水后,取角膜保存。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)雙抗體夾心法檢測(cè)房水及外周血中sICA
4、M-1的含量,角膜組織行HE、ICAM-1免疫組織化學(xué)染色觀察。 結(jié)果: CNV生長(zhǎng)達(dá)中央平均為16.4±1.8d;排斥組植片平均存活12.4±1.3d,其他組角膜植片長(zhǎng)期存活;正常房水和血清中均可檢測(cè)到少量的sICAM-1,它們的濃度分別為16.55±3.63 ng/L,95.15±6.26 ng/L;術(shù)后早期D組房水及外周血中sICAM-1含量即升高,至排斥反應(yīng)前達(dá)最高水平分別為53.87±19.23 ng/L。37
5、8.78±30.58 ng/L,在觀察期內(nèi)維持高水平;血清和房水中的含量變化密切相關(guān)(r=0.999,P<0.05)。排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí),炎性細(xì)胞布滿全層,基質(zhì)結(jié)構(gòu)紊亂,有大量新生血管,部分內(nèi)皮消失,ICAM-1在角膜新生血管內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)增強(qiáng),在部分單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)部位表達(dá)較B、C組明顯增強(qiáng)。 結(jié)論: ICAM-1在角膜移植免疫排斥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用,術(shù)后監(jiān)測(cè)sICAM-1濃度變化對(duì)排斥反應(yīng)的發(fā)生有一定預(yù)測(cè)和早期診斷
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