銅綠假單胞菌的耐藥表型與耐藥基因型研究.pdf

1、銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）是一種常見的人畜共患機(jī)會致病菌，給人畜健康帶來巨大威脅。本研究自臨床分離PA51株，并對其耐藥表型、耐藥基因型、外毒素及動物致病性進(jìn)行了檢測分析，以期為臨床銅綠假單胞菌病的研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
　　自河北及周邊地區(qū)2011年-2014年臨床發(fā)病的雞、豬體內(nèi)分離并純化，通過形態(tài)學(xué)及PCR技術(shù)進(jìn)行鑒定后，獲得PA野毒51株;采用Kirby-Bauer紙片擴(kuò)散法(K-B法)

2、進(jìn)行3類17種抗菌藥的藥物敏感性試驗(yàn)，結(jié)果均表現(xiàn)為多重耐藥性;對氨基糖苷類藥物鏈霉素、阿米卡星、卡那霉素、新霉素、慶大霉素和大觀霉素的耐藥率依次為84.3％、84.3％、78.4％、78.4％、54.9％和25.2％;對喹諾酮類藥物氧氟沙星、恩諾沙星、鹽酸左氧、加替沙星、諾氟沙星和環(huán)丙沙星的耐藥率依次94.1％、82.4％、80.4％、78.4％、62.7％和25.2％;對β-內(nèi)酰胺類藥物頭孢拉定、青霉素、頭孢曲松鈉、頭孢噻肟、頭孢哌酮

3、鈉/舒巴坦鈉的耐藥率依次98.0％、98.0％、70.6％、2.0％和0.0％。
　　本文對51株P(guān)A分離株相應(yīng)的抗性基因進(jìn)行了PCR檢測。6種氨基糖苷類耐藥基因(AMEs)的檢測結(jié)果顯示，ant(3")-Ⅰa、aac(6')-Ⅰb、aac(3)-Ⅱa、aph(3")-Ⅰb(strA)、aph(6')-Ⅰd(strB)、Aph(3')-Ⅱa的陽性率由高到低依次為98.0％、51.0％、43.1％、41.2％、31.4％、17.6％

4、;其中有1株為所測AMEs基因陰性，3株為6種基因全攜帶者;16SrRNA甲基化酶（armA、rmtA、rmtB）的檢測結(jié)果均為陰性;喹諾酮類耐藥質(zhì)粒的檢測陽性率由高到低依次為aac(6)-Ⅰb-cr(13.7％)、qnrS(9.8％)、qnrB(5.9％);對gyrA基因中的氟喹諾酮耐藥決定區(qū)(Quinolone-resisitant determining region，QRDR)進(jìn)行PCR檢測、測序、并進(jìn)行序列分析，結(jié)果僅3株QR