新型極性修飾色譜固定相的研究及其在藥物分析中的應(yīng)用.pdf

1、反相色譜是應(yīng)用最廣泛的、最高效的分離技術(shù),它具有高分離效率,極好的重現(xiàn)性以及與質(zhì)譜兼容的特點(diǎn)?，F(xiàn)在市面上有很多不同品牌的反相-液相色譜固定相,并且一直在研發(fā)新的品種。然而,現(xiàn)存的硅膠-基質(zhì)的液相色譜固定相有一些缺點(diǎn),例如,分離堿性化合物時(shí)峰拖尾,在某種程度上限制他們的應(yīng)用。在過(guò)去幾十年,色譜工作者們長(zhǎng)期致力于改善硅膠基質(zhì)的固定相的化學(xué)穩(wěn)定性相關(guān)的研究工作。到目前為止,有很多極性-嵌入或者極性-封端新型固定相,這些固定相在反相色譜條件下對(duì)

2、極性、強(qiáng)堿性以及可電離的化合物進(jìn)行色譜分離時(shí)能夠提供很好的分離性能。
　　研究目的：
　　1、設(shè)計(jì)合成三個(gè)新型C10二肽類(lèi)極性固定相,并對(duì)其合成路線進(jìn)行篩選優(yōu)化。
　　2、二肽類(lèi)固定相制備成C10色譜柱后,用國(guó)際公認(rèn)方法對(duì)其色譜性能進(jìn)行測(cè)試評(píng)價(jià)。
　　3、考察制備的二肽類(lèi)極性色譜柱實(shí)際分離分析不同類(lèi)型藥物色譜能力。
　　4、對(duì)利福噴丁的人體生物等效性進(jìn)行研究。
　　實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及結(jié)果：
　　1、設(shè)計(jì)

3、合成了三個(gè)新型C10二肽類(lèi)極性固定相:
　　在DCC,DMAP作用下,采用直接縮合法制備中間體十一烷甘氨酰胺,再與N-氨丙基三甲氧基硅、N-氨丙基二甲基甲氧基硅、N-氨丙基二異丙基甲氧基硅反應(yīng),制得相應(yīng)的硅烷中間體,產(chǎn)率分別為83.3％、85.1%、82.0%;然后再分別與硅膠鍵合、六甲基二硅氮烷封端制備得到多聚C10二肽固定相、C10二甲基二肽固定相和C10二異丙基二肽固定相。
　　2、對(duì)制備的三個(gè)C10二肽類(lèi)固定相進(jìn)行了

4、性能評(píng)價(jià),并獲得了預(yù)期效果:
　　柱效與峰形測(cè)試、Engelhardt測(cè)試、Tanaka測(cè)試、Neue測(cè)試結(jié)果均表明我們制備的極性修飾二肽類(lèi)固定相具有高選擇性、高靈敏度和優(yōu)秀的柱效。殘余硅羥基測(cè)試中分離吡啶和苯酚時(shí),分離因子高,吡啶的峰拖尾因更低,表明我們制備的固定相封端效果很好。pH穩(wěn)定性研究結(jié)果顯示,二甲基固定相在強(qiáng)酸、強(qiáng)堿條件下穩(wěn)定性很好。將同一樣品連續(xù)進(jìn)樣1000次,過(guò)程中保留時(shí)間、峰形均小于1%,說(shuō)明我們制備的固定相性能

5、穩(wěn)定重現(xiàn)性好。流動(dòng)相的pH對(duì)選擇性的影響的實(shí)驗(yàn)表明這些二肽固定相可以在pH1.5-11范圍內(nèi)使用。
　　3、對(duì)制備的三個(gè)C10二肽類(lèi)固定相進(jìn)行了藥物分析應(yīng)用研究,也獲得了預(yù)期效果:
　　用制備的極性二肽類(lèi)固定相考察以下八組不同類(lèi)型的混合物在更寬泛的pH值和高水流動(dòng)相條件下的分離效果:7類(lèi)水溶性纖維素混合物;8類(lèi)核苷酸混合物;α-,δ-,γ-生育酚混合物;β-受體阻斷劑;4個(gè)對(duì)羥基苯甲酸酯類(lèi)物質(zhì);咖啡因代謝物等。結(jié)果表明,這八