細(xì)胞外pH值對(duì)培養(yǎng)的主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞膜電位及鉀通道活動(dòng)的影響.pdf

1、酸堿平衡是人體維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的一個(gè)重要因素.正常細(xì)胞外液pH值(pH<,o>)為7.35-7.45.在一些病理或生理?xiàng)l件下,如組織缺氧、酸中毒或堿中毒等,pH<,o>可在6.5~8.1之間波動(dòng),并由此引發(fā)血管張力的改變.pH<,o>引起的血管張力改變,在不同組織,不同血管段的表現(xiàn)也不同,如在肺動(dòng)脈,pH<,o>降低使之收縮,而在腦血管中,PH<,o>的降低則導(dǎo)致血管的舒張,其機(jī)制還未完全明了.有人認(rèn)為pH<,o>是通過改變內(nèi)皮源性血管

2、活性物質(zhì)的釋放而影響血管的舒縮狀態(tài)的:也有人認(rèn)為pH<,o>是通過細(xì)胞內(nèi)pH值(pH<,i>)影響細(xì)胞代謝及信號(hào)傳遞途徑從而改變血管平滑肌細(xì)胞張力的;還有實(shí)驗(yàn)表明pH<,o>可以直接作用于血管平滑肌細(xì)胞,改變其舒縮狀態(tài)從而調(diào)節(jié)血管張力,這種作用與血管平滑肌細(xì)胞上鉀通道的功能狀態(tài)有密切的關(guān)系.目前對(duì)pH<,o>影響肺、腦及腸系膜等阻力血管張力的研究較多,pH<,o>調(diào)節(jié)大血管張力的機(jī)制,尤其是離子機(jī)制還不明了.實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1、成功培養(yǎng)并鑒定

3、了乳鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞、小牛主、肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞及乳鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞.2、用全細(xì)胞膜片鉗記錄的電流鉗制方式測(cè)得SD大鼠7日齡乳鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的靜息膜電位為-37±5mV(n=30).觀察到SMC上主要存在的鉀通道電流為K<,Ca>,對(duì)TEA(5mM)敏感,對(duì)4-AP(5mM)不敏感,Ach對(duì)該通道電流無明顯作用.RF/6A細(xì)胞膜電位有兩個(gè)高峰,峰值約為-25mV和-55mV.膜上存在三種鉀通道電流:鈣激活性鉀通道(K<,Ca>)、瞬

4、時(shí)外向性鉀通道(K<,I>)及內(nèi)向整流性鉀通道(K<,IR>).3、在急性pH<,o>改變中,pH<,o>減低使主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞膜超極化,鉀電流增大.而升高則使膜去極化,鉀電流減小.TEA(5mM)能夠阻斷這種改變,而4-AP(5mM)對(duì)此沒有影響.在慢性實(shí)驗(yàn)中,孵箱中CO<,2>濃度升高使膜去極化,鉀電流減小.結(jié)論:實(shí)驗(yàn)觀察到SD大鼠乳鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞上主要存在的鉀通道為K<,Ca>通道,在個(gè)別細(xì)胞上見到K<,v>通道.這可能與物種