淫羊藿素(ICT)通過(guò)AhR與ER交互應(yīng)答抑制乳腺癌的體外作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的:研究淫羊藿素(Icaritin,ICT)在體外實(shí)驗(yàn)中對(duì)芳香烴受體(AhR)的作用及ICT通過(guò)激活A(yù)hR進(jìn)而降解ERa蛋白作用,初步探討淫羊藿素是否具有激動(dòng)芳香烴受體的作用和淫羊藿素是否通過(guò)芳香烴受體和雌激素受體抑制性交互應(yīng)答抑制人乳腺癌 MCF-7細(xì)胞的增殖的分子機(jī)制。
　　方法:1.人乳腺癌 MCF-7細(xì)胞體外培養(yǎng):體外培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7。2.淫羊藿素對(duì)AhR的影響:熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)及RT-PCR法檢測(cè)淫羊藿素

2、對(duì)AhR靶基因CYP1A1的影響,探討淫羊藿素是否具有激動(dòng)AhR的作用。3.淫羊藿素對(duì)AhR與ER交互應(yīng)答影響的研究:利用Western-blot法,然后觀察ICT和E2合用時(shí),對(duì)MCF-7細(xì)胞的ERa蛋白及細(xì)胞增殖的影響,探討初步ICT是否通過(guò)激動(dòng)AhR從而誘導(dǎo)ERa受體蛋白降解進(jìn)而抑制乳腺癌細(xì)胞增殖。
　　結(jié)果:1.熒光素酶檢測(cè)結(jié)果顯示 ICT濃度大于等于1μM時(shí)能顯著激動(dòng)AhR的表達(dá)。2.RT-PCR法測(cè)定結(jié)果顯示淫羊藿素對(duì)

3、AhR靶基因CYP1A1具有激動(dòng)作用。3.Western- blot法檢測(cè)結(jié)果顯示1μM ICT與100pM E2合用時(shí)能顯著誘導(dǎo)ERa蛋白降解,且這種結(jié)果能被蛋白酶抑制劑MG逆轉(zhuǎn)。結(jié)論:1.ICT能激動(dòng)AhR靶基因CYP1A1的表達(dá),又具有ERa激動(dòng)作用。2.ICT與 E2合用時(shí),能顯著誘導(dǎo)ERa蛋白降解,且這種作用能被蛋白酶抑制劑 MG逆轉(zhuǎn)。初步探討 ICT能激動(dòng) AhR并通過(guò)AhR-ER抑制性交互應(yīng)答抑制E2誘導(dǎo)的MCF-7細(xì)胞增