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文檔簡介
1、目的:研究亞油酸(LA)的衍生物(S)-甘油-單亞油酸鹽(脂肪酸甘油,F(xiàn)AG)通過阻礙核因子-B(NF-B)信號的激活,抑制可誘導的一氧化氮合酶(iNOS)依賴性一氧化氮(NO)的形成及炎癥基因表達的作用。
方法: RAW264.7巨噬細胞經(jīng) FAG處理后,利用 Griess反應法檢測了 NO的產(chǎn)生量,采用蛋白質(zhì)印跡免疫分析法和實時定量 RT-PCR及酶聯(lián)免疫吸附實驗測定了 iNOS和炎性細胞因子的mRNA與蛋白質(zhì)表達水平。另
2、外,為了檢測 FAG對 NF-KB轉(zhuǎn)錄和 IB的磷酸化及降解,利用了蛋白質(zhì)印跡免疫分析法。采用熒光素酶檢測法和凝膠遷移率實驗評價了 FAG對 NF-KB信號激活的影響。
結(jié)果:與經(jīng)脂多糖(LPS)刺激的陰性對照組相比,經(jīng) FAG處理的實驗組 N O產(chǎn)生量明顯減少;iNOS和促炎性細胞因子白介素(IL)-1K、I L-6的表達明顯減少;而腫瘤壞死因子(TNF)-KB的表達無差異。另外,F(xiàn)AG可以阻礙 IB的磷酸化、泛素化以及 N
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