一種變態(tài)反應性炎癥哮喘小鼠模型的建立與評價.pdf

1、目的:研究一種變態(tài)反應性炎癥哮喘小鼠模型的建立方法，并評價其效果。
　　方法:(1)將20只清潔級雌性BALB/c小鼠隨機編號后分成兩組:支氣管哮喘模型組和空白對照組。(2)致敏:于實驗第0、7、14天每只小鼠分別腹腔注射0.2 ml致敏液(1.0mg/ml的OVA0.1 ml與等體積液態(tài)氫氧化鋁佐劑混和),對照組用生理鹽水代替。(3)激發(fā):于第17-23天連續(xù)7天將小鼠置于密閉容器中,以0.8mg/ml OVA磷酸鹽緩沖鹽溶液2

2、0 ml霧化吸入,每天一次,每次30 min,。(4)激發(fā)后研究:在最后一次激發(fā)后48 h(第25天)處死小鼠,收集支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)進行白細胞總數(shù)以及嗜酸性粒細胞、中性粒細胞、淋巴細胞和單核細胞的計數(shù)和分類,收集支氣管肺泡灌洗液上清液和小鼠血清,測定IFN-γ和IL-4,肺泡灌洗液行甲苯胺藍染色觀察肥大細胞(mastocyte,MC),同時留取肺組織行HE染色,觀察

3、模型組和對照組肺組織的病理變化。
　　結果:模型組在激發(fā)過程中出現(xiàn)明顯頭面部瘙癢,呼吸加深加快,安靜少動,弓背,前肢縮抬等哮喘急性發(fā)作表現(xiàn)。支氣管肺泡灌洗液中白細胞總數(shù)及嗜酸性粒細胞分類明顯增多。BALF經甲苯胺藍染色后可見肥大細胞。血清及BALF中IFN-γ下降,IL-4增高。肺組織病理切片見小支氣管及伴行血管周圍有較多炎癥細胞浸潤,可見大量嗜酸性粒細胞,杯狀細胞增生,平滑肌增厚,部分肺泡間隔融合形成肺氣腫。而對照組小鼠肺組織肺