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文檔簡介
1、惡性黑色素瘤是源于黑素細(xì)胞、痣細(xì)胞的一種惡性程度較高的腫瘤,多發(fā)生于皮膚。惡黑對(duì)放療、化療不敏感,而手術(shù)治療僅對(duì)早期原位惡黑有一定療效。其發(fā)病率雖然僅占皮膚惡性腫瘤4﹪,死亡率卻占總數(shù)的79﹪。盡管大量的臨床和病理學(xué)方面的影響惡黑進(jìn)展的因素已被確認(rèn),但至今沒有能夠精確的預(yù)測腫瘤的侵襲行為的、單一組織學(xué)的、免疫組化的、血清學(xué)的、分子的標(biāo)記物。腫瘤厚度被認(rèn)為是惡黑侵襲性的預(yù)測物,但卻不是穩(wěn)定的參數(shù),并且它與較早期的原發(fā)腫瘤或轉(zhuǎn)移性疾病無相關(guān)
2、性。因此,有必要確立一種可預(yù)測惡黑生物學(xué)行為的,獨(dú)立于腫瘤厚度的分子標(biāo)記物。 黑素細(xì)胞來源與外胚層的神經(jīng)嵴,該細(xì)胞以及惡黑細(xì)胞均具有神經(jīng)嵴衍生物所固有的一些特征,如黑素細(xì)胞與神經(jīng)元類似均有較多的樹枝狀突起;惡黑細(xì)胞具有神經(jīng)嵴衍生物所固有的標(biāo)記物,如原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性惡黑細(xì)胞內(nèi)的外周蛋白神經(jīng)特異性烯醇化酶等標(biāo)記物。 有研究發(fā)現(xiàn)神經(jīng)標(biāo)記物微管相關(guān)蛋白2在色素痣、惡黑的早期放射狀生長階段和垂直生長階段的細(xì)胞內(nèi)高表達(dá),而在轉(zhuǎn)移性惡黑
3、細(xì)胞內(nèi)弱表達(dá)或表達(dá)缺失。因此微管相關(guān)蛋白2基因的表達(dá)與惡性黑色素瘤的侵襲性具有一定的相關(guān)性。 微管相關(guān)蛋白1亦是微管相關(guān)蛋白家族中的成員之一。微管相關(guān)蛋白和微管蛋白是組成微管的主要成分。微管是細(xì)胞骨架的主要結(jié)構(gòu)成分之一,參與細(xì)胞的許多生理功能。微管相關(guān)蛋白1廣泛表達(dá)于中樞及外周神經(jīng)系統(tǒng),主要分布于神經(jīng)元的軸突和樹突中,可以調(diào)節(jié)微管動(dòng)力學(xué)狀態(tài)并促進(jìn)微管聚合成束,對(duì)軸突導(dǎo)向、延長及突觸發(fā)育起重要作用。 有研究發(fā)現(xiàn)在發(fā)育的神經(jīng)
4、元的軸突和樹突,特別是在樹突中,微管相關(guān)蛋白1B和微管相關(guān)蛋白2有重疊的功能,能夠通過調(diào)節(jié)微管的重組使神經(jīng)元遷移和軸索生長。有體外研究發(fā)現(xiàn)微管相關(guān)蛋白1在惡性黑色素瘤細(xì)胞系中亦有表達(dá)。由此我們推測微管相關(guān)蛋白1在色素痣和惡性黑色素瘤中表達(dá)可能亦具有某種規(guī)律性。研究目的1.探討微管相關(guān)蛋白1基因在色素痣、原位及侵襲性惡性黑色素瘤中的表達(dá)情況。 2.探討微管相關(guān)蛋白1B在不同侵襲度的惡性黑色素瘤細(xì)胞中的表達(dá)情況。 材料和方法
5、 1.收集2001-2006年大連醫(yī)科大學(xué)附屬-院病理科及皮膚科確診為惡性黑色素瘤患者及皮內(nèi)痣患者的石蠟包埋組織塊。其中皮內(nèi)痣為8例,原位惡性黑色素瘤為6例,侵襲性惡性黑色素瘤為25例。分別做HE染色和免疫組化染色,觀察MAP1在皮內(nèi)痣和惡性黑色素瘤組織中的表達(dá)情況。 2.通過Real Time PCR法檢測具有不同轉(zhuǎn)移能力的人惡性黑色素瘤細(xì)胞株:WM35、WMl 341B、WM983A中微管相關(guān)蛋白1B基因的相對(duì)表達(dá)量
6、。 結(jié)果 1.免疫組化染色顯示:微管相關(guān)蛋白1的染色強(qiáng)度與皮內(nèi)痣和惡性黑色素瘤皮損具有相關(guān)性:微管相關(guān)蛋白1在皮內(nèi)痣中的染色強(qiáng)度與惡性黑色素瘤中的染色強(qiáng)度平均灰度值有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,微管相關(guān)蛋白1在皮內(nèi)痣中的表達(dá)強(qiáng)于在惡性黑色素瘤組織的表達(dá);在原位與侵襲性惡性黑色素瘤中的染色強(qiáng)度平均灰度值無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.以WM983A細(xì)胞的總RNA作為標(biāo)準(zhǔn)品,測得三種不同轉(zhuǎn)移性惡性黑色素瘤細(xì)胞株中微管相關(guān)蛋白1B基因的相對(duì)表達(dá)量
7、為wM983A=1:WM1341B=0.35;WM35=0.21。隨惡性黑色素瘤細(xì)胞侵襲度的增高,微管相關(guān)蛋白1 B的表達(dá)量增加。 結(jié)論 1.在臨床標(biāo)本中微管相關(guān)蛋白1在良性色素痣細(xì)胞及惡性黑色素瘤細(xì)胞中均有表達(dá),同時(shí)在良性組織中微管相關(guān)蛋白1的表達(dá)量明顯高于惡性黑色素瘤組織中的表達(dá)。 2.首次發(fā)現(xiàn)微管相關(guān)蛋白1B在惡性黑色素瘤細(xì)胞中的表達(dá)量隨其侵襲度的增高而明顯增高,表明微管相關(guān)蛋白1B在惡性黑色素瘤的侵襲發(fā)生
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